肉桂对滋肾丸盐酸小檗碱在正常大鼠前列腺分布动力学的影响.pdfVIP

肉桂对滋肾丸盐酸小檗碱在正常大鼠前列腺分布动力学的影响 任钧国，刘建勋 (中国中医研究院西苑医院实验研究中d，北京100091) 滋肾丸出自金元四大家之一的李东垣所著《兰室秘藏》一书，由黄柏、知母、肉桂三昧药组成．具 滋肾清热，化气通关之功．原方治“不渴而小便闭，热在下焦血分也”。现代以此方加减化裁用于阴虚火旺 证或湿热下注证的前列腺增生症、前列腺炎、慢性尿路感染等病，效果明显。药效学研究表明滋肾丸有 明显的抗实验性丈鼠前列腺增生的作用。肉桂为方中佐使药，可温阳化气，助膀胱气化以通利小便，同 时可制约黄柏、知母两药之寒，具有佐助、佐制之意；也可引药入血，引火归元，以助药力，具有引经 之意。药效学实验证明滋肾丸有抗实验大鼠前列腺增生的作用。因此，本实验选择前列腺作为药物在体 内分布研究的靶器官．考察肉桂对黄柏化学成分盐酸小檗碱在前列腺分布的影响，为肉桂引经作用提供 实验依据。 1实验材料 amulense 1．1药品与试剂黄柏为芸香科落叶乔木植物黄檗(关黄柏)PhellodendronRupr．除去栓皮的树 皮；知母为百合科多年生草本植物知母AnemarrhenaasphodcloidesBgc．的根茎；肉桂为樟科常绿乔术植物 cassia 肉桂CinnamomumPresl的树皮；均购自西苑医院药剂科．滋肾丸水煎液：分别取黄柏、知母、肉 桂适量，常规制备水煎液．均浓缩至相同浓度，然后按一定体积比(黄柏：知母：肉桂为】：1：O．1)混合。4C 储存备用；知柏水煎液；分别取黄柏、知母水煎液，按滋肾丸比例混合，4C储存各用(两种水煎液中盐 酸小檗碱和的浓度分别为I．25和5．55mg／m1)。盐酸小檗碱标准品均购自中国药品生物制品检定所；乙腈、 甲酵为色谱纯(Hsher)；其它试剂均为分析纯。 SB·C18 色谱柱、AccuBOND C18固相萃取柱．200m∥3ml(Agilent美国) 公司提供。 2实验方法 SB—C18 2．1色谱条件色谱柱：Zorbax 样量：20¨l(血浆、前列腺) 2．2标准溶液的制各 小檗碱标准品溶液，4℃保存。 0．I％TFA的甲醇洗脱，洗脱速度保 腺匀浆)lml．4000rpm／min离心后上柱，先用2ml水洗柱，再用4ml ‘ 2．4分析方法的确证 2．4．1方法的选择性在选定的色谱条件下，盐酸小檗碱的保留时间分别为和13rain，大鼠空白血浆、空 白血浆中加入盐酸小檗碱、空白前列腺匀浆、空白前列腺匀浆中加入盐酸小檗碱及给药后大鼠血浆样品 ——236—— 和前列腺样品的色谱图表明血浆与前列腺匀浆中的内源性物质不干扰测定。 2．4．2标准曲线的建立与定量范围精密吸取盐酸小檗碱标准品溶液100pl于离心管中，挥去甲醇，加入 2．1进行实验，以浓度(x)和峰面积(Y)进行线性回归，分别求得盐酸小檗碱的回归方程： 精密吸取盐酸小檗碱标准品溶液各1001al于离心管中，挥去甲醇，加入空白大鼠前列腺匀浆Iml，配 线性范围：1．25-100ng／ml最低检测限：0．625ng／ml。 2．4．3方法的精密度与回收率 取大鼠空白血浆，加入盐酸小檗碱，按2．4．2的方法配成含盐酸小檗碱的样品．并进行精密度和回收 率实验，实验结果见表l。 取大鼠空白前列腺匀浆，加入盐酸小檗碱，按2．4．2的方法配成含盐酸小檗碱的样品，并进行精密度 和回收率实验。实验结果见表2。 表I盐酸小檗碱在血浆中的精密度与回收率(n=3) 表2盐酸小檗碱在前列腺匀浆中的精密度与回收率(n=3) 2．4．5样品的稳定性取2．4‘3的三种浓度的样品，进行样品处理后盐酸小檗碱的稳定性实验，结果显示 24h内检测稳定。 2．5实验设计取正