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检测乞肝病毒的方法比血清标志物EIA法有更高的临床检 种模式中,均可存在不同程度的HBV复制。表明对HBV—
出率。定量PCR比定性PCR有更高的临床检出率。 M临床意义的认识需进行观念更新。
国内学者赵洪宁等应用荧光素标记的半巢式引物在扩增 国内学者张玲等研究表明卸kAg和HBVDNA有明显
中能量转移的定量聚合酶链反应(C羽口R)。对63例肝功能异的相关,抗一HBe阳性者病毒未完全停止复制,只是复制水平
DNA含量测定,采用AG一9600降低。
常的肝病患者血清进行HBV
AmpliSmsorQP(R系统中荧光DNA分析检测仪,检测荧光综上所述,斑点杂交、聚合酶链反应(PCR)定性及定量检
衰减情况。并与普通PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)进测的运用,使人们从以往HBV血清标志物(HBV-M)中形成
行比较。研究结果证实,q取聚方法具有特异性强、敏感度 的观念有所改变。目前,PCR是检测HBV病毒血症最为敏
高,可检出低水平HBVDNA等优点。 感的方法。然而长期以来,Ptm以定性为主。仅能查出阴/阳
国内学者吴晓蔓等研究证实,HBVDNA含量与乙肝病 性结果,即普通定性PCR还存在一些不足之处:①只有定性
型无明显关系;DNA阳性率与乙肝病型及HBV—M有关;结果,无法给出临床需要的定量结果;②由于采用电泳检测,
HBV 易引起P僳产物的交叉樗染,增加了假阳性结果的可能性;
DNA定量与定性相关性良好。定量PCR可真实反映
HBVDNA复制水平,有广泛的应用前景t在仅需了解HBV⑦采用的染色剂溴乙锭是强烈致癌物,可能危害操作人员及
DNA的复制与否的诊断中,可用定性PCR;对HBV—M的意污染环境。而荧光定量PCR检测HBVDNA起始模板,由于
义应重新认识。 采用荧光技术和闭管操作。完全克服了常规PCR方法的3个
国内向海平等采用荧光定量PCR方法发现HBV—M各
主要缺点,值得临床推广应用。
DNA结果的对比研究
两群方法检测乙型肝炎血清HBV
许青田一武艳霞崔中锋刘春礼李新月 熊飞升
DNA结
随着对乙型肝炎病毒(HBV)分子生物学研究的深入,以 2.2荧光定量PCR与定性PCR检测血清HBV
果比较见表2。
及定性PCR与定量PCR检测方法的普遍开展,目前对乙型
肝炎血清学标志物(}狂Ⅳ一M)的临床意义已有了新的认识。 2.3荧光定量PCR与定性陋tHBV功魄检测结果的
符合率见表3。
本文对132例乙型肝炎HBV—M(}玎Ⅺk、抗一HIM、HⅪ吣、
抗一HBe、抗一}Ⅱ3c、抗一HBc 3.讨论
IgM)不同模式同时采用荧光定
量PCR及定性PCR检测血清HBVDNA,并将检测结果进行 多年来ELISA方法检测血清HBV—M一直是临床诊断
比较。现报道如下。 HBV感染的传统手段,但它实际检测的只是人体对HBV的
l材料和方法 免疫反应状态。如果仅以HBV—M的检测结果作为判断
1.1病例选择研究对象为2000年10月~2002年10月HBV感染及传染性、治疗效果的指标以及HBV是否在体内
我院门诊及收治住院的各型乙型肝炎患者132例血清样品, 复制则具有一定的局限性,只有检测HBVDNA才能确证
HBV感染后在体内的复制并追踪预后。丙聚合酶链反应
诊断椭.-=2000年(西安)全国病毒性肝炎与肝病学术会议修
订的诊断标准。血清置一20℃保存备检。 (PCR)方法则是检测HBV病毒本身,是检测HBV病毒血症
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