梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖过程中Wnt信号通路的变化.pdfVIP

· 1656 · 中国痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(9)：1656—1660 [文章编号] 1000-4718(2014)09．1656．05 梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖过程中 Wnt信号通路的变化 傅淑平 ， 杨 丽 ， 洪 浩 ， 偶 晨 ， 张荣华 (南京中医药大学针药结合省部共建教育部重点实验室，江苏 南京210023； 暨南大学药学院中药教研室，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：观察梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)增殖过 程中Wnt信号通路的变化。方法 ：(1)采用机械分离及差速贴壁法分离培养 sD大鼠BMSCs，将细胞分为空白对照 组与梓醇(1．0mg／L)处理组，流式细胞术检测各组细胞细胞周期分布情况，计算其增殖指数。(2)实时荧光定量 PCR法检测各组细胞中Wnt3a、Wnt5a、Wntl1及p—cateninmRNA的表达水平；Westernblotting技术检测各组细胞B． catenin蛋白的表达变化。结果：(1)空白对照组与梓醇处理组BMSCs增殖指数分别为8．90％±0．46％和 17．93％ ±1．68％(P0．01)。(2)与空白对照组相比，梓醇处理组WntSa、Wntl1、p—cateninmRNA及 B-catenin蛋白表达均 明显提高，但Wnt3amRNA表达无显著变化。结论 ：梓醇在促进 BMSCs增殖过程中可同时激活经典与非经典 Wnt 信号通路。 [关键词] 梓醇 ；骨髓间充质干细胞；细胞增殖；Wnt信号通路 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．09．019 W ntsignalingpathwayisinvolvedincatalpol-inducedproliferationofrat bonemarrow mesenchymalstem cells FU Shu-ping ，YANG Li，HONG Hao ，OU Chen ，ZHANG Rong-hua (KeyLaboratoryofAcupunctureandMedicineResearchofMinisterofEducation，NanjingUniversityofChineseMedicine， Nanjing210023，China；CollegeofPharmacy，JinanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：tzrh~如u．edu．cn； shuping．@gmail．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatethechangesofWntsignalingpathwayineatalpol—inducedproliferationofrat bonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)．METHODS：TheBMSCswereisolatedfromSDrats，purifiedbydiffer— entialtimeadherentmeth6danddividedintocontrolgroupandcatalpol(1．0mg／L)rgoup．Floweytometrywasusedtode— tecttheproliferationindexofBMSCs．ThemRNA levelsofWnt3a，Wnt5a，Wntl1andB．cateninwasevaluatedbyreal— timePCR．Inaddition，theproteinexpressionlevelof3-cateninwasdeterminedbyWesternblotting．RESULTS：Prolife— rationindexwasincreasedfrom8．90％ ±0．46％ to17．93％ ±1．68