检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用.pdfVIP

第四届中国兽药大会——兽医微生物学、兽医生物制品学学术论坛论文集(2012年) 检测牛病毒性腹泻一粘膜病病毒TaqMan 荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用 陈其兵’，薛霜，漆世华，朱薇，张萍，谢红玲，温文生，吴玉石 (武汉中博生物股份有限公司，湖北武汉430070) 5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一 种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT-PCR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血 03～1 贝／llL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至1 04拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特 异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVI)V的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否 污染BVDV进行监测。 关键词：牛病毒性腹泻一粘膜病病毒；荧光定量RT-PCR；检测 viral 牛病毒性腹泻病(bovine