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西京医院科研支撑平台 开放实验项目目录 （2009版） 目 录 一、肿瘤生物学国家重点实验室 （一）流式细胞仪工作站单元 1.血细胞或淋巴细胞的亚群检测 2.细胞周期检测 3.细胞凋亡检测 4.细胞增殖检测 5.免疫表型分析 6.可溶性分子检测 （二）荧光定量PCR仪工作站单元 1. 基因型及基因表达差异分析 （三）细胞培养基病毒载体功能单元 1．细胞的常规培养 2．重组病毒载体的包装制备 3．病毒颗粒的收集 4．病毒滴度的测定 5．病毒载体对目的细胞的感染 6．病毒感染细胞的筛选与培养 7．倒置显微镜下摄像 （四）蛋白质功能单元 1. 光学分析检测2. 亚细胞的分离 3. 超声破碎细胞样品 4. 冻干样品 .真空离心干燥机 6.Western blot 7.双向电泳： .单克隆抗体的制备 正 文 一、肿瘤生物学国家重点实验室 实验室于2006 年被评为肿瘤生物学国家重点实验室。实验室总面积3300平方米，设备总值 700 万元。实验室设组织细胞培养和病毒载体包装单元、蛋白质功能学、Q-PCR单元、流式细胞仪和基因操作分子克隆单元功能单元。主要研究方向为（1）消化道道肿瘤的发病机制和转移机制（2）胃癌肝癌诊断的早期预警研究；（3）慢性肝病的干细胞治疗和胆汁性肝淤积发病机制研究。实验室专职研究人员3名，其中正高2名、中级1名。在国家211工程经费资助下近年来实验室新进购置了大量先进仪器，拥有美国BD公司流式细胞仪1台、Roache 公司和MJ公司荧光定量PCR仪各1台、Bio-rad凝胶电泳分析仪、SORVA高速低温离心机、forma细胞培养箱6台，荧光显微镜--正置、倒置--各1台及照相系统一套（OLYMPUS）等，可为全院的科学实验研究提供良好的实验技术平台。 （一）流式细胞仪工作站单元 具体位置：西京消化病院16楼 单元简介：本实验室于2005年引进美国BD公司FACSCanto型流式细胞仪一台。本仪器光学系统设计特点：488nm，20mw固态激光器和633nm，17mw氦氖激光器；采用专利技术的光路设计扩展了可检测的荧光信号（6色荧光参数，2个散色光）高灵敏度，更适合检测弱表达或含量极低的指标 开放实验项目： 1.血细胞或淋巴细胞的亚群检测 （1）项目说明：本实验室可以完成血细胞或淋巴细胞的亚群检测。FCM采用各种抗血细胞表面分化抗原(CD)的单克隆抗体，借助于各种荧光染料测定一个细胞的多种参数，以正确地判断出该细胞的属性。各种血细胞系统都具有其独特的抗原，当形态学检查难以区别时，免疫表型参数对各种急性白血病的诊断和鉴别诊断有决定性作用。利用FCM可以测定出血细胞表达各种抗原的水平，协助临床确诊。T淋巴细胞?(CD3+),?T?辅助细胞?(CD3+CD4+),?T?抑制细胞(CD3+CD8+),?B?淋巴细胞（CD19+或CD20+），NK?细胞?(CD3-CD56+)等。 （2）收费标准： ①不提供试剂30元/样本（院内）； 40元/样本（院外）。 ②提供试剂70元/样本（院内）；80元/样本（院外）。 （3）联系方式： 陈峥 电话邮箱 xjxhlab@163.com 2.细胞周期检测 （1）项目说明：本实验室可以进行动物细胞、培养细胞等各种细胞的细胞生长周期分析。在细胞的生长周期中，由于各个时期的DNA含量的不同，我们可以通过PI单染法标记DNA，并通过流式细胞仪分析各期中荧光素量的同步，最后通过软件分析处细胞各期的分布状态，计算出G0／G1﹪,S﹪, G2／M﹪，可以了解细胞的周期分布和增值活性。 （2）收费标准： ①不提供试剂30元/样本（院内）； 40元/样本（院外）。 ②提供试剂70元/样本（院内）；80元/样本（院外）。 （3）联系方式： 陈峥 电话邮箱 xjxhlab@163.com 3.细胞凋亡检测 （1）项目说明： 本实验室可完成肿瘤细胞、组织细胞、培养细胞等各种细胞的凋亡检测。在细胞凋亡的过程中，由于细胞膜表面特定蛋白表达的改变，我们可以通过相应的荧光素标记这种特异蛋白，从而得到各期细胞（早期凋亡、晚期凋亡、活细胞以及坏死细胞）在总细胞中的比率。 （2）收费标准： ①不提供试剂30元/样本（院内）； 40元/样本（院外）。 ②提供试剂70元/样本（院内）；80元/样本（院外）。 （3）联系方式： 陈峥 电话邮箱 xjxhlab@163.com 4.细胞增殖检测 （1）项目说明：本项目可对恶性肿瘤DNA含量进行分析用荧光染料(碘化吡啶PI)染色后对细胞的DNA含量进行分析，将不易区分的群体细胞分成三个亚群(G1期，S期和G2期)，DNA含量直接代表细胞的倍体状态，非整倍体细胞峰的存在可为肿瘤诊断提供有力的依据