应用噬菌体展示技术筛选与人树突状细胞结合的肿瘤相关分子.pdfVIP

应用噬菌体展示技术筛选与人树突状细胞结合的肿瘤相关分子 金亮亮，刘艳，李维娜，何颖，张阀，张伟‘，张荚起‘ (第四军医大学生物技术中心，陕西西安710032) 合的分子．方法：应用噬菌体展示技术，以人DCs为固相筛选细胞，对人肝癌T7噬菌体cDNA文库 进行4轮生物淘选，将所得噬菌斑PCR扩增产物测序后行同源性分析．结果：将随机筛选到的100 个噬菌斑行PCR扩增，经测序和同源性分析，证实人肝癌T7噬菌体cDNA文库中与DCs结合的分子 有：人铁蛋白轻链、甲胎蛋白、o【1微球蛋白前体，G蛋白偶联受体116和跨膜蛋白49等。结论： 从^肝癌T7噬菌体eDNA文库中筛选到能与人DCs结合的分子，为阐明人肝癌发生发展过程中肿瘤 免疫选选相关机制奠定了基础． 【关键词】 噬菌体展示技术；树突状细胞；结合分子；筛选 screenthe tothehumandendriticcells(DCs)fromtheT7 molecules 【AbstractlObjective：To binding select ofhumantumorlivereDNA．Methods：DCsWaSusedaSthe cellsand phagedisplaylibrary target theT7select ofhumantumorlivereDNAwasscreenedfor4 phagedisplaylibrary cycles．After chainreactionof DNA ofthescreenedcloneswere polymerase bacteriophageplaque，thesequence with theaminoacid of moleculeswere the sequenced,and sequencetarget comparedGenBank．protein 4 database for of sequence usingBLAST．Results：After．bioamplificatedcycles，thesequencespositive cloneswere for moleculestoDesfrom100 screenedclones investigatedhomology．Thebinding randomly wereidentifiedsuchas ferritin Hompsapiens lightpo|ypeptide(FTL),Homoi sapiens G alpha-feto—protein(AFP)，Homosapiensalpha-I—microglobulin／bikuninprecursor(AMBP)，Homosapiens l16(GPRl16)，Homotransmembrane protein-coupledreceptor sapiens protein are forfurther ofthemolecular Thecurrentresults formoleculestoDesuseful studies