实验十三邻二氮菲分光光度法测定铁条件的研究及微量铁的测.docVIP

实验十三 邻二氮菲分光光度法测定铁条件的研究及微量铁的测定（4学时） 一. 实验目的 1. 通过学习本实验学会分光光度法测定条件的选择方法。 2. 练习722型（或721型）分光光度计的使用方法。 二．实验原理 应用分光光度法进行定量分析时，通常要经过称样、溶解、显色及测量等步骤，其中显色的条件是影响测定灵敏度和准确度的主要因素。显色反应条件包括显色剂的用量、溶液酸度、显色反应时间＆温度、试剂加入的顺序以及干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定出最佳分析方案，使测定既准确又快速。本实验通过对Fe(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应条件的研究，初步了解拟定分光光度法测定条件的方法。 邻二氮菲是测定微量铁的高灵敏性、高选择性试剂，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在酸度为pH 2~9的溶液中，邻二氮菲和Fe2+生成橘红色配合物： 该配合物的lgK稳=21.3（20℃），在510 nm处有最大吸收，摩尔吸光系数ε510＝1.1×104L-1·mol-1·cm-1。 邻二氮菲与Fe3+也能生成3：1的淡蓝色配合物，其中lgK稳= 14.10。因此，在显色之前应预先用盐酸羟胺（NH2OH·HCl）将全部的铁还原为Fe2+。 2Fe3++2NH2OH+ HCl = 2Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl- 邻二氮菲与Bi3+、Cd2+、Hg2+、Ag+、Zn2+等离子生成沉淀，与Co3+、Cu2+、Ni3+等离子形成有色配合物，因此应设法消除以上离子的干扰作用。 三．实验仪器及试剂 722（或721）型分光光度计；pHS-3B型（或其它型号）酸度计；pH玻璃电极；甘汞电极；50 mL容量瓶；100 mL容量瓶；5 mL吸量管；10 mL吸量管。 100μg·mL-1铁标准溶液；10.0μg·mL-1铁标准溶液；0.12%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺水溶液；HAc-NaAc缓冲溶液（pH＝4.5）； 2.0 mol·L-1HCl溶液；0.4 mol·L-1NaOH溶液。 四．实验步骤 1．测定条件的研究 （1）吸收曲线的绘制 吸取10.0μg·mL-1铁标准溶液3.00mL 于50mL容量瓶中，加入10 %盐酸羟胺溶液1.00mL，摇匀，放置2min。然后再加入0.12%邻二氮菲水溶液2mL，以水稀释至刻度，摇匀。用3cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，从440~560nm每隔10nm测定一次吸光度（在500~520nm之间，间隔5nm测量一次）。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上确定测量的适宜波长。 （2）有色配合物的稳定性 用步骤1中所配溶液，测定吸光度随时间的变化规律，找出有色配合物稳定的时间范围。在510nm波长下，用3cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，每隔一段时间（3min，30min，1h，1.5h，2h），测一次吸光度值。以放置时间为横坐标、吸光度为纵坐标绘出A-t曲线，由曲线得出结论。 （3）显色剂用量的影响 取7只50 mL容量瓶中，用移液管准确移取10.0μg·mL-1铁标准溶液5.00mL于各容量瓶中，加入10%盐酸羟胺溶液1.00mL放置2min后，加入HAc-NaAc缓冲溶液5mL，然后分别准确加入0.12%邻二氮菲水溶液0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00和3.00mL以水稀释至刻度，摇匀。用3cm比色皿，以蒸馏水为参比，在510nm波长下，分别测定各溶液的吸光度。然后以加入邻二氮菲的毫升数为横坐标、各溶液的吸光度为纵坐标作图，从曲线上确定显色剂的最适宜加入量。 （4）溶液酸度的影响 吸取100μg·mL-1铁标准溶液10.00mL于100mL容量瓶中，加入2mol·L-1HCl溶液10mL，10%盐酸羟胺溶液10mL，放置2 min后，加入0.12%邻二氮菲20mL，以水稀释至刻度，摇匀。 取7个50mL容量瓶，用移液管分别吸取上述溶液5.00mL于各容量瓶中，然后用吸量管分别向各容量瓶中依次加入0.40 mol·L-1NaOH溶液0.00、1.00、2.00、4.00、5.00、7.00及9.00mL，以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从≤2开始逐渐增加至12以上。用3cm比色皿，以蒸馏水为参比，在510nm波长下，分别测定各溶液的吸光度。然后用酸度计分别测定各溶液的pH值。以溶液的pH值为横坐标、相应的吸光度为纵坐标，绘出A-pH曲线，并确定适宜的pH范围。 2． 样品中铁含量的测定 1) 标准曲线的绘制 取6个50mL容量瓶，用吸量管分别吸取10.0μg·mL-1铁标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00mL于各容量瓶中，各加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，放置