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中国食用菌2008。27(suppl．)：94—97 ISSN
1003-8310
CN53一1054／Q
EDIBLEOF
FUNGICHINA
限制性内切酶介导整合技术在真菌功能基因研究中的应用
郝小丽1，韦建福p，魏士平2”，姚元红1
(1．云南农业大学植物保护学院，云南昆明650201；2．中国地质大学海洋学院，北京100083)
The ofRestriction
Enzyme-Mediated
Application Integration
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FunctionalGenomicsStudies
Fungi
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Xiao-lil，WEIJian-ful，WEI Yuan-hongt
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Pmtr,ction。Yunnan 650201，P．R．China；
(1．Faculty AgriculturalUniversity，Kunming
ofMarine of
Science，ChinaUniversity 100083，P．R．China)
2．College Geosciences，Beijing
摘要：限制性内切酶介导整合(REMI)技术是一种在限制性内切酶存在的条件下，将线性化的质粒DNA随机插
入到真茵基因组DNA中，从而产生插人突变的技术。本文综述介绍了限制性内切酶介导的整合技术的一些基本情
况，包括REMI的步骤、技术原理、应用范围、应用概况、技术优点和存在问题等。
关键词：限制性内切酶介导的整合(REMI)：真菌；应用
自然界中大约有200多万种真菌u，包括动植物病原
菌、动植物共生菌和生态系统中必须的生物降解菌，这些
真菌与人类关系十分密切。近年来，随着测序技术的飞速
发展，真菌基因序列以及全基因组序列数据的不断增加和 体系，真菌的遗传转化研究大大落后于细菌，最早由
累积，但功能基因的研究呈籀对落后的态势，许多真菌基
因的生物学功能都是在模式生物转录组学 遗传转化【扪，但由于转化子后代没有出现应有的表型，且当
时重组DNA技术如SouthernBlot等还没有发明，无法证明
(Transcriptomics)和蛋白质纽学(Proteoroics)大量数据
积累的基础上作出的假说，这些假说中有许多都是以基因 外源DNA已经整合到基因组中。该报道曾一度遭受怀疑。
序列解折为基础的，其依据是基于序列比对、基因表达调 l 真菌遗传转化的基本条件
控数据等非直接证据。证明这些假说的正确性是真菌基因
在细菌的遗传转化成功后，许多研究者试图按照细菌
组研究中最为关键的研究内容。目前，最直接的证明方法
转化的方法对真菌进行遗传转化。但一直没有成功。后
是通过基因插入失活途径。面基因插
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