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首届全国食用菌中青年专家学术交流会 组织分离法在食用菌选择育种工作中的应用与实践 王卓仁 (华中农业大学菌种实验中心武汉430070) 食用菌新品种的选育，目前主要有选择育种(或自然选种)、杂交育种、诱变育种、原生质体融合 育种和基因工程育种等方法。选择育种也称为常规选种、常规育种，是以食用菌在自然界中的变异为基 础，有意识地控制和积累有益的突变，经过不断选优汰劣，培育出新的优良品种的育种方法，也是一种 能较简单而有效地获得优良品种的方法。选择育种可通过以下两种方式来达到选育出优良品种的目的。 一是收集各地的有关菌株，进行生产试验，通过栽培比较，多代定向选择，最终筛选出生产性能优良的 菌株。二是从现有的主栽食用菌品种内，在大规模栽培生产的基础上。选取生产性能表现最优秀的个体， 然后通过孢子分离、组织分离等方法，选育出与亲本菌株性状有所区别的新菌株。本文所要讨论的主要 是组织分离法在选择育种第二种方式中的应用与实践。该方法也是与微观的孢子分离选择育种法相对应 的一种选种方法。 1．组织分离法的概念及在选择育种工作中的意义 通过切取子实体、菌核、菌索的--4块组织来获取纯培养的方法，所做组织分离法，是菌种分离最 常用的方法之一。组织分离法所获得的纯培养遗传性状稳定、变异小。根据分离材料的不同，组织分离 法又可分为子实体组织分离法，菌核组织分离法和菌索组织分离法。在选择育种工作中，最有效和常用 的是子实体组织分离法。从规模化大量栽培所获得的子实体中，选取已发生自然正向变异的个体，通过 子实体组织分离法，来稳定该分离物的遗传特性，再经过定向筛选，进而达到选育出新品种的目的。 2．组织分离法应用于食用蕾选择育种工作的理论依据 2．1遗传学和细胞学方面的依据 按照遗传学和细胞学的观点，细胞分裂周期越短，生长越快的生物，在一定时间内发生变异的几率 越高。食用菌的细胞分裂和生长速度比植物和动物都快，因此菌种群体中变异个体存在的几率大大增加。 菌丝在生长过程中自身发生自然突变韵突变率较高，据测算大约每366个细胞中平均就有一个细胞发生 自然突变。所以菌种转管繁殖的后代与亲本菌种不可能完全一样，转管次数越多，变异越犬，稍有不慎， 选择失误。极易造成整个菌株生产性能的下降。同理．在菌丝大量生长繁殖后形成的子实体与原菌株之 间，以及同一品种的不同子实体之间，在遗传学上也都是有差异的。一方面，随着时间的推移，继代保 藏的食用菌品种的一些优良性状会逐渐因负向突变而丧失；另一方面，通过栽培出菇，可从长出的子实 体中选择具有正向突变的优良个体，经组织分离后获得新的优良分离培养物。当然按数学的概率统计分 析，经组织分离所获得的培养物，在综合性状和质量水平上会有三种表现：与亲本相近，但不完全相同： 优于亲本；劣于亲本。但在连续的栽培比较和子实体组织分离工作中，有经验的技术人员可通过选择农 艺或形态性状与亲本有所区别的子实体来获取新的菌株。 2．2生理学方面的依据 人工栽培的食用菌菌种，大多生长并被保存在一定的半人工合成的琼脂培养基上。在这类培养基上， 菌种体虽能进行正常的营养生长，但不能出菇。长期的继代保藏，将导致菌种体固有的繁殖生长因子长 期不被启动。同时菌种体的许多胞外分解酶类，由于基质内天然底物的缺乏而长期不能被诱导产生，这 样将影响其日后分解天然基质的能力。因此，从生理学的角度来说．菌种体通过生产栽培，然后经选取 具典型亲本特征或优于亲本性状的子实体进行组织分离，这本身就是一次利用天然培养料对菌株进行复 牡的过程。 3．应用组织分膏法进行选择育种工作应注意的方法和原捌 首届全国食用菌中青年专家学术交流会 3．1把握选择种菇的时机 选择种菇的时机非常重要。一是要选择在出菇的盛菇期挑选种菇，这样获取综合性状优良的子实体 的几率才高。二是要选择在最能体现亲本优良性状的出菇季节采摘种菇。如欲选育耐低温香菇品种，则 应选择在寒冷冬季栽培并正常出菇的菌袋子实体分离。RI要根据不同的菇类和栽培模式，选择在最有 可能获取优良个体的出菇批次挑选种菇。如袋栽平菇和金针菇应在第一批菇的盛菇期挑选种菇。袋栽香 菇的第一批菇因畸形菇多，所以应选在第二批菇的盛菇期挑选种菇。 3．2坚持选用最具所需性状的典型子实体作为分离材料 如欲选择培育短柄香菇菌株，则每