薄层色谱-培训讲稿.pptVIP

朋友们 新春快乐！春节九天耍安逸了撒，现在该静下心了哈。 薄层色谱 分离原理、条件选择和操作方法 薄层色谱的概念及分离原理 薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于固-液吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。由于薄层色谱一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 μg）的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500 mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的化合物。此外，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。 薄层色谱是将吸附剂涂布在玻璃板或铝板或塑料板等片材上，形成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一端点上样品混合液，然后将其竖直放入一个盛有少量展开剂的的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层，借毛细作用向上移动，推动样品混合物也向上移动。经过在吸附剂和展开剂之间的多次吸附-溶解作用，将混合物中各组分推移到不同的位置，分离成孤立的样点，实现混合物的分离。 薄层色谱在有机合成与有机分析中的应用 1、分离混合物： 一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。 2、精制提纯化合物： 有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。 3、鉴定化合物： 在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。 4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。 什么是“比移值”？ 在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离 Li （cm 或 mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离 Lo （cm 或 mm ）之比值，称为相对移动值，或比移值，用Rf 表示：?  Rf = Li / Lo  在不同的展开条件下，各化合物的移动距离不会相同，而在同一展开条件下，相对于展开剂的移动距离，各化合物有可比较的展开数据即相同的比移值Rf 。? 在相同条件下测得的比移值可以用于化合物的薄层色谱特征值进行比较对照。但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度、吸附剂颗粒的大小、酸碱性、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。 薄层色谱条件 固定相（吸附剂和支持剂）选择 薄层色谱用的吸附剂：薄层吸附色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶；分配色谱的支持剂为硅藻土和纤维素。 ?硅胶是无定形多孔性物质，略具酸性，适用于酸性物质的分离和分析。薄层色谱用的硅胶分为：硅胶H不含粘合剂；硅胶G含煅石膏粘合剂；硅胶HF254含荧光物质，可用于波长为254 nm紫外光下观察荧光；硅胶GF254既含煅石膏又含荧光剂等类型。 与硅胶相似，氧化铝也因含粘合剂或含荧光剂而分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。 粘合剂除上述的煅石膏（半水合硫酸钙：2CaSO4·H2O）外，还可用淀粉、羧甲基纤维素钠（CMC）。 薄层色谱条件 2. 展开剂选择 ?? ??薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大，对化合物的洗脱力也越大????选择展开剂时，除参照溶剂极性来选择外，更多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验： ???? （1） 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强； ??? （2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。 ??? ?当一种溶剂不能很好地展开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前一溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需多次仔细选择才能确定。?  薄层色谱的使用操作 1. 制板