反相液相色谱中柱相比的影响因素.pdfVIP

( ) 第 30 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 10 期 　　　　　　　 　 　　 　　　　　 　　 　　　 2002 年 10 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1179～1182 反相液相色谱中柱相比的影响因素 张维平 　高　娟　耿信笃 (西北大学现代分离研究所 , 西安 710069) ( ) 摘 　要 　从理论上阐明了热力学观点所定义的柱相比 即溶质的保留自由能变为零时的 k ′值 与溶质种类、 柱温、固定相以及溶剂种类的依赖关系。通过研究 3 种配基链长不同的固定相对 7 种非极性苯的取代物溶质 保留行为的影响 ,发现柱相比与固定相对溶质吸附力有关 ;通过对 9 种正链烷溶质在 4 种温度下的保留行为 的研究 ,发现了柱相比随温度升高而增大 ,也发现了柱相比与同系物溶质的碳数无关 ;通过对 3 种正链醇同系 物 ,3 种正链酸同系物 , 以及丙酮、乙腈和异丙醇共9 种置换剂对 9 种烷基醇同系物溶质色谱保留行为影响的 研究 ,发现柱相比随溶剂极性增大而减小。 关键词 　反相液相色谱 , 计量置换模型 ,相比 ,溶质 ,溶剂 ,固定相 ,柱温 1 　引　　言 容量因子是液相色谱中最常用的一个表征溶质色谱行为的参数 。然而 , 因容量因子中含有的柱相 比无一公认的定义,致使影响到对溶质分配系数与色谱行为所进行的相关方面的深入研究。经典色谱 中将柱相比定义为在固定相上吸附溶剂的体积与流动相体积之比1 。当然 ,相比应是一个与溶质种类 无关的量。当其用于高效液相色谱中时 ,其在固定相表面上吸附溶剂的体积难以准确测定。故迄今未 ( ) 2 ～4 有用柱相比来讨论液相色谱的。随着液相色谱中计量置换保留模型 SDMR 的问世 ,对其计量参 数的研究已有很多5 ～8 ,笔者之一从热力学观点给柱相比一新的定义 ,即非溶质项对溶质容量因子 k ′的 9 贡献 ,或溶质的保留自由能变为零时的 k ′值 。依据这一新的定义 ,柱相比应与溶质的种类无关 ,只与 固定相及流动相种类有关。这与经典LC 中对相比的定义有相同之处 ,并依此研究色谱中的热力学。 柱相比在溶质的容量因子 k ′中占有很大的比例, 因此深入了解柱相比及其影响因素 ,无论是用色谱法 准确测定溶质在两相间的分配系数还是研究色谱热力学都有至关重要的作用。本文用柱相比的新定义 拟进行柱相比对固定相、温度、小分子溶质种类及小分子溶剂种类依赖关系的研究。对此问题的深入研 究能加深了解小分子溶质保留过程的实质 ,并且通过了解小分子溶质保留过程的实质进而对蛋白大分 子的色谱保留过程奠定一定的理论基础。 2 　理论部分 经典LC 中柱相比的定义为: 固定相吸附溶剂的体积 Vs 与流动相体积 Vm 之比。即 : φ= V V ( 1)