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小麦根系中有机酸的离子色谱法分析研究 屈 锋 牟世芬 侯小平 沈冬青 李继云 孙建华 （中国科学院生态环境研究中心 北京 100085） 提要 研究了离子交换和离子排斥法用于小麦根系中有机酸分析的色谱条件，首次建立 了植物根系中有机酸 的离子色谱分析方法。分别用Na2CO3/NaHCO3Na2CO3/NaOH和HCl作离子交换和离子排斥分离的流动相， 选用化学抑制型电导检测器。对样品中柠檬酸、苹果酸、丁二酸、反丁烯二酸、乙酸、草酸的检测限为0.1～ 0.5g/mL，相对标准偏差为1.78% 2.97%，样品加标回收率为10 10%。 关键词 离子色谱法，小麦根系，有机酸 HPICE-AS1.HPIC-AS4A分离柱；HPIC-AG4A保 1 前言 护柱；AMMS-ICE和AMMS- 型阴离子微膜抑制 对多数样品的分析而言，由于有机酸的离子色 器；电导检测器；美国光谱物理公司生产的4400型 谱法不需要对样品做柱前衍生反应就可直接进样， 积分仪。有机酸标准溶液用分析纯试剂配成1mg/ 因此已广泛用于水、饮料、酒类、大气等样品中的有 mL水溶液于冰箱内4（ ）存放。 机酸检测，而植物根系中有机酸的离子色谱法分析 2.2 色谱条件 研究尚未见报道。 用离子排斥法测定丁二酸、苹果酸、反丁烯二 根系分泌物是植物在生长过程中通过根系的不 酸、乙酸时分离柱为HPICE-AS1，抑制器为AMMS- 同部位向生长基质 如（土壤、营养液等）中溢泌和分 ICE淋洗液为0.5mmol/LHCl0.8mL/min，再生 泌的一组种类繁多的物质[。其中根系分泌的有机 液为5.mmol/LNaOH,2.2mL/min。用离子交换 酸对根际养分有显著的活化作用[2]。据报道，根系 法测草酸和柠檬酸时分离柱为HPIC-AS4A，保护柱 分泌和渗出的有机酸主要有草酸、柠檬酸、苹果酸、 为AG4A，抑制器为AMMS- ，分别用3.6mmol/L 酒石酸、丙酸、丁酸、延胡索酸 反（丁烯二酸）、琥珀酸 Na2CO3-3.4mmol/LNaHCO3和 20mmol/LNaCO3 丁（二酸）、乙醇酸等 10多种[2。 -2mmol/LNaOH作淋洗液，流速1.5mL/min，所用 植物种类、品种和生长环境不同，其根系分泌物 再生液均为25mmol/LHSO4，流速4.mL/min。进 的组成和含量亦异[1]。由于环境条件千变万化，样品 样量50L，以保留时间定性，峰高定量。 成分复杂，又受测试手段和实验条件所限，因此对根 3 结果讨论 系分泌物的组成研究仍处于探索阶段。本文试将离 子色谱法用于小麦根系中有机酸的分析测定，详细 3.1 分离方式的选择 研究了有关的色谱条件，建立了快速、灵敏而简便的 离子排斥色谱法是分析有机酸的主要方法[34。 分析方法。方法用于实际样品的测定取得良好结果， 用离子排斥法可测定丁二酸、苹果酸、反丁烯二酸、 为进一步研究农作物根系所含有机酸与植物利用土 乙酸等有机酸。草酸、柠檬酸的pKa值较小，离解程 壤养分的能力以及与农作物产量高低的关系提供了 度大，受Donnan排斥作用强，保留时间短[5]，受水负 科学依据。该方法的建立对于有机酸在农业生产中 峰及无机阴离子峰干扰，不宜进行定量分析。然而草 的开发利用，提高农作物产量等研究有重要意义。 酸、柠檬酸在碱性条件下以阴离子形式存在，可在阴