细胞骨架的光镜观察—微丝的观察.pptVIP

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2017-08-09 发布于重庆
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细胞骨架的光镜观察—微丝的观察.ppt

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细胞骨架的光镜观察—微丝的观察.ppt

细胞骨架的光镜观察实验目的实验原理实验方法作业实验目的掌握显示细胞骨架的染色方法。光镜观察细胞骨架纤维。实验原理　　在真核细胞的细胞质中,普遍存在着一个由几种纤维状结构组成的网架,它由微管,微丝,中间纤维和微梁构成。细胞骨架决定着细胞形状的保持和改变,同时也是胞质中许多物质和颗粒运输以及细胞各种运动的结构基础,甚至还被认为在能量转化和信息传递方面也有作用。　　.如果用非离子去垢剂TritonX-100处理细胞,可将质膜结构与细胞内许多蛋白质溶解,但细胞骨架蛋白却不被溶解破坏。因此,细胞先经TritonX-100处理后,再用考马斯亮蓝G250染色,其胞质背景着色弱,而细胞骨架着色清晰,从而提高分辨率。实验方法撕取洋葱鳞茎内的表皮细胞(约1cm大小若干片)置于装有pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中,使其下沉。吸去磷酸缓冲液,用1% TritonX-100处理20-30min。吸去TritonX-100,用M-缓冲液洗三次,每次8min。 3%戊二醛固定20min。 PH6.8磷酸缓冲液洗三次.每次8min。 0.2%考马斯亮蓝G250染色20-30min。用蒸馏水洗1-2次,细胞置于载玻片上,加盖玻片,于普通光学显微镜下观察。作业绘洋葱鳞茎表皮细胞骨架图,并作简要分析。 * * 返回大纲返回返回返回返回