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非病理性因素对血细胞仪细胞体积直方图影响.doc
非病理性因素对血细胞仪细胞体积直方图影响
?(山东兰桥医学科技有限公司 韩作湘 王国锋)
??? 随着医学技术迅速发展,血液分析仪的研制水平不断提高,检测原理不断完善。血液分析仪不但检测速度快,精确度高,操作简便,而且还能提供白细胞、红细胞、血小板的体积分析直方图,以直观反映细胞的大小分布情况,为检验人员监控仪器工作状态,判断检验结果提供了有效的工具。但是日常工作中好多因素往往影响到血细胞直方图的形态,影响结果的准确性,本文我们主要探讨非病理性因素对血细胞直方图的影响。
一、仪器因素:凡影响细胞脉冲信号的因素,都可以使血细胞直方图发生变化,除血细胞自身体积大小外,其他如仪器的阈值、孔电压和脉冲的增益都影响脉冲大小,导致直方图发生变化。
二、试剂因素:试剂的性能好坏可直接影响血细胞直方图的变化。
稀释液:稀释液的主要作用是稀释血液以及保持稳定的渗透压、电导率、PH值。稀释液的渗透压、电导率、PH值跟仪器自身的要求不符,都会造成仪器直方图的变化。渗透压高出仪器的要求,会造成细胞体积的收缩,这样在以电阻法计数的仪器中,在白细胞直方图方面,部分单核细胞由于体积收缩后,被规划为淋巴细胞,部分中性粒细胞由于体积收缩被规划为单核细胞,这样就会造成白细胞直方图淋巴细胞假性偏高、中性粒细胞假性偏低,直方图倒置(图1)。 (图1)??? 在红细胞直方图方面,红细胞体积收缩后造成直方图宽度变窄,MCV、HCT数值都会相应降低(图2)。(图2)??? 渗透压低于仪器自身的要求,会造成细胞体积的膨胀,这样在以电阻法计数的仪器中,在白细胞方面,部分淋巴细胞由于体积膨胀被规划为单核细胞甚至中性粒细胞,部分单核细胞由于体积膨胀被规划为中性粒细胞,这样就会造成直方图淋巴细胞假性偏低,中性粒细胞假性偏高(图3)。????????? (图3)在红细胞方面,红细胞体积膨胀后会造成MCV升高,直方图宽度变宽(图4)???????????????????????????????????? (图4)??? 电导率发生改变,会造成仪器接收到的脉冲的信号的强度发生改变,因此直方图的宽度也会发生相应的变化。PH值发生改变,会影响红细胞的溶解程度以及对白细胞膜的破坏程度,对直方图也会造成影响。
溶血素:溶血素的作用主要是1)溶解红细胞;2)使白细胞穿孔,胞浆流失,检测内核;3)跟红细胞释放的血红蛋白反应用比色法检测血红蛋白浓度。溶血素的浓度过大、用量过多、溶血时间过长都会造成溶血过度,使白细胞的直方图压缩,单核细胞增高,严重的会造成直方图倒置(图5)。(图5)??? 溶血素的浓度过低、用量偏少、溶血时间过短则会造成红细胞溶血不全,白细胞总数严重升高(图6)。(图6)??? 溶血素PH值的变化也会影响红细胞的溶解程度以及白细胞穿孔程度,对白细胞直方图都会产生不同程度的影响。抗凝剂:抗凝剂的种类和浓度不同会影响血细胞的体积变化,同样影响血细胞直方图,通常应选用EDTA-K3 或EDTA-K2,1.5-2.0mg抗凝剂抗凝1.0ml全血。
三、样本放置时间:一般认为样本应在采集后20分钟至二个小时内检测。若放置时间过短,可能存在血小板没有完全解离、血小板凝集,总数偏低(图7)。(图7)??? 若放置时间过长,则易引起细胞的变形,尤其是一些免疫功能亢进的病人,其淋巴细胞容易变成异型淋巴细胞,从而使白细胞直方图变形(图8)。四、采血因素:
采血部位:采血部位不同会对结果以及直方图有着微小的影响。下图9是同一人次在指血和静脉血两种模式下的血液分析报告单。(图9)
采指血混入组织液:采集指血时应当尽量避免混入组织液。混入组织液会促使血小板凝集,使白细胞产生假性增高,血小板产生假性减低(图10)。
??? 以上是血液分析仪细胞体积直方图的简单分析,血液分析仪检测仅是一种筛选手段,但它提供的报警信息以及异常直方图必须引起我们足够的重视,应结合临床相关信息综合评估结果。
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