显微镜观察药敏技术与应用研究概况.pdfVIP

48 中圄防旁套恚2008年10月第30卷增刊II 基础部分 显微镜观察药敏技术及其应用研究概况 胡患义 (同济大学附属上海市肺科医院上海200433) observa- 显微镜观察药敏技术(microscopic(涂片阳性标本7d，涂片阴性标本lOd)，罗氏培 tion 养阳性时间平均为23．6d(涂片阳性标本16d，涂 drugsusceptibility，MODS)是2000年Cav— iedes等[13建立的一种结核病实验室快速诊断和耐片阴性标本28d)，二者的培养阳性时间差异有高 药性测定技术。该技术1周左右即可获得痰标本结 核分枝杆菌(MTB)培养和药敏结果，引起了国肺结核的诊断，38例涂片阳性肺结核患者标本 内外学者的普遍关注[2-3]。本文简要介绍该技术及MODS阳性33例，阳性率86．8％；罗氏培养阳性 其我们的研究应用情况。 21例，阳性率55．3％，差异有高度显著性(P< 一、MODS原理 MODS是一种对MTB形态学进行显微镜观察测，如以临床诊断为金标准，则涂片、罗氏培养、 和耐药性检测的液态培养方法，由于MTB在液体 快速培养仪检测和MODS的诊断敏感性分别为 培养基中生长分泌索状因子，使其呈现索状特征性 52．6％、70．2％、70．2％和64．9％，特异性均为 结构，通过倒置显微镜对MTB的特征性索状结构 进行观测，来确定是否有MTB生长以及其对药物 显著快于快速培养仪的15．5d和罗氏培养的 24 的敏感性。因此，MODS技术有着双重功效，既 d[6‘。上述研究结果表明，MODS技术快速、灵 能进行MTB的培养，又能同时进行耐药性测定。 敏，检测效果达到或优于快速培养仪检测系统，而 这是其他传统方法所不具有的。该法将液化处理后 其费用低廉，不需特殊仪器设备，因此有可能是较 的痰标本加入含有液体培养基的24孔细胞培养板， 为理想的结核病实验室快速诊断新技术。 分别加入高低浓度的抗结核药物，置37℃温箱培 养，每天在倒置显微镜下观察特征性索状结构，直 MoDS和常规罗氏药敏试验检测MTB利福平，异 至不含药对照管出现MTB生长，观察含药管 烟肼、链霉素和乙胺丁醇的耐药性，结果MODS MTB生长与否，判断药敏结果[2]。 检测利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇的药敏结 二、MODS应用研究 果与罗氏药敏符合率分别为100％、97％、92％和 1．快速检测MTBCaviedes等Ⅲ用荧光染色、95％；药敏时间MODS平均为7d，常规罗氏药敏 罗氏培养、7H11固体培养、细菌生长指示管法、 MoDS和PCR六种方法同步检测172例临床诊断 的肺结核患者痰标本，结果阳性检出率分别为 临床分离株进行异烟肼和利福平的耐药性检测。如 以米氏7H10平板药敏结果为判断标准，则MODS 78％、76％、78％、93％、92％和90％；其中4 种培养方法豹平均阳性时间分别为：罗氏培养24d 检测新发肺结核患者异烟肼耐药性的敏感性为 (6～59 d)，7H11固体培养14．5d(4～28d)，细99．5％，特异性为95．7％，阳性、阴性预测值为 d(4～39 d 95．7％和99．5％，准确性为99．o％；检测利福平 菌生长指示管法10 d)，MODS技术9 (4～3t d)。Moore等[43采用MoDS与常规罗氏培耐药性的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及准 养检测4213份痰标本，结果1908份痰标本培养 确性均为100％。最近报道[9]MODS和快速培养 阳性，其中MODS阳性1799份(94％)，罗氏培仪检测耐多药结核患者结果比较，如以快速培养仪 养阳性