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农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (3): 409~413
·研究论文 ·
兔出血症病毒 RTPCR 检测方法的建立及应用 *
1 ** 2 1 1 1 2 2 1
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王 芳 李超美 杨龙圣 徐为 中 张则斌 侯玉峰 陈国强 何孔旺
(1. , 210014 2. , 210001)
江苏省农业科学院兽医研究所 南京 ； 南京出入境检验检疫局 南京
摘要:按照 GenBank 上公布 的兔 出血症病毒( )基 因序列设计 1 对 引物 ， 以 RHDV 发病兔 的新鲜肝为材料 ， 提取总
RNA， 进行 cDNA 的合成和 PCR 扩增， 结果能扩增出与预期的 269bp 大小一致的片段， 该产物序列与公布的 基 因序列
同源性 95.8% 98.5%。该方法可特异性地检测出 RHDV， 其最小检 出 RHDV 的 RNA 浓度为 1.66ng/ L， 敏感性为血凝试验
～ 滋
4 ， 结
（HA ） 的 4 10 倍 ， 表明 已成功地建立了 RHDVRTPCR 检测方法 。 用该方法和 HA对兔出血症发病兔各组织脏器进行检测
伊
， 、 肾脏、 脾脏、 血液和肺 ， 而 ， 其它均为
果表 明 ， 在检测发病死亡兔各脏器中 HA 检测 阳性的病料为肝脏 RTPCR 检测除粪便外
20 12 表 明 RTPCR RHDV ， 不
阳性； 该方法还能够检测出 － ℃保存 个月的阳性病料。 方法检测 特异性强、 敏感度高 、 重复性好
仅可用于 RHD 临床诊断和流行病学调查 ， 而且在兔肉等兔类产 品的检疫方面具有很好的应用前景。
： (RHDV) RTPCR
关键词 兔 出血症病毒 ； ； 病毒分布
中图分类号: S188 文献标
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