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光化学法合成高基因转染效率的聚乙烯亚胺 徐冬梅， 余家会，刘永彪，孙汉文，姚思德 (中科院上海应刷物理研究所201800) 摘要： 基因治疗就是将正常基因通过载体导入具有突变基因的生物自治中，用这种方 ，．、 法可以医治多种基因疾病¨’。基因治疗的重要环节之一就是基因转染载体的选择及 合成。 基因转染载体主要分为病毒类载体和非病毒类载体两大类，聚阳离子纳米凝胶 属于非病毒类载体，’芭与病毒类载体相比，典有低毒、低免疫反应、无基因插入片 断大小限制、制备方便、保存容易等优点：；和脂质体等非病毒类载体相比，价格较 低，粒径大小及表面电荷等可通过化学反应进行控制，其转染效率及体内转染的靶 向性有可能更好，开展该类载体合成方法的研究越来越多，如：微乳液聚合法堙]、 辐射交联聚合(通常是在乳液中反应)。“、辐射接枝聚合n1、辐射引发的自由基聚合 法嵋：、无皂乳液聚合呻1、辐射沉淀聚合法和高分子稀溶液辐射法等等。用这些手段和 方法已经合成出了大量具有较高基因转染效率的聚阳离子载体，但是在这些方法中 大多需要使用具有一一-一定毒性的表面活性剂，或者制备出的聚阳离子化合物粒径较大。 … 因此，我们尝试用光化学的方法来制备聚阳离子纳米凝胶。 低聚的聚乙烯亚胺(PET)通过紫外光照射产生自由基，进一步聚合成粒径分布 较窄且粒径可控的高分子纳米凝胶。该过程无!l焉添加任何的表面活性剂和引发剂， 从而具有较低的细胞毒性。并且用陔法合成的纳米凝胶的粒径及表面电荷可通过不 同的预聚体起始浓度、溶液PH值、光巳照强度、反应时间等等来控制。基因转染载体 corre]atI。OFl 纳米凝胶由光相干光谱仪photo (SEM)和原子力显微镜(AFM)进行表征。如图所示，为合成的不同样品的PCS， SEM和AFM的测试结果，合成出的纳米凝胶的形状通常为球型。 细胞水平研究表明，该纳米凝胶具有低的细胞毒性和低的免疫源性，体外细胞 转染证明了用该法合成的聚乙烯业胺纳米凝胶具有较高的基因转染效率，同时证明 在进行细胞转染时，小牛向．清培养不会造成綦因转染率的改变，对进一步开展动物 组织基因转染具有重要意义。初步的裸鼠基因转染研究表明，体内基因转染效果更 佳。进一步的研究还在继续。 一 一 ：| ^ J L J一一， 一 _| —．．．．．．．．—．．—卜__ _| ∑ 一意 一。，㈡o√．o㈡_．．．一一 蕊黎一一孵燮懑渗鐾馨驴礓蠢蓄霉*砷麟J飘雌叠翟翟蕊熏蓬嚣罐藩掣 i囊』囊糍■■■■■■■■■1●●●●●●●●●●—■■—11—II叫ll 『j re3·Flow cancercellswithtile¨．I Figu cytonletr)ofh…nlung nanogcls ndnuoPesfeRcc ofthe Samllle(right，…-Ignmc、1L)y100) microscopyimsge 参考文献 【1