肺癌肿瘤药敏和耐药基因MDR-Ⅰ、MRP、GST-π表达的相关性研究.pdfVIP

大会置‘皇’ 上海市医学会2002年肺科学术年会 量不宜过多，以免气囊过大阻塞大气道造成窒息，此时应调整纤支镜先端部位置，使水 囊紧贴需探查部位。USP因其显示深度所限，且肺内多为含气组织，所以大于3cm的粘 膜下肿瘤或远于3cm的纵隔内病灶，其病变远场部分(包膜及实质)往往显示不清晰或为 无回声区，由此可能影响对病灶性质的判断。可采取不断变动探头位置的方法，最大程 度地显示病灶的全貌。在USP诊断支气管粘膜下病变时，应尽可能地获得病灶的最大剖 面图及其毗邻结构的声像图。 选择性应用经支气管镜腔内超声诊断气管、支气管粘膜下、管外肿瘤，尤其对小病 灶和正确引导病灶、淋巴结穿刺具有较大的价值。 肺癌肿瘤药敏与耐药基因MDR—I、MRP、 GST一1nr表达的相关性研究 上海市胸科医院200030 韩宝惠 廖美琳 苏建中 冯久贤 王恩忠 董强刚 肺癌发病率及死亡率在近十年来呈明显上升趋势，已成为是严重威胁人民健康的 恶性肿瘤之_，近60一80％的肺癌患者在诊断时已属晚期，治疗多采用以化疗为主的多 学科治疗；而目前化疗方案的确定多依赖于临床经验作为选择药物的手段，难以对具有 肺癌耐药的患者作出有针对性的选择，成为临床目前所难于克服的难题之一，近年来尽 管各种药敏检测方法对预测肿瘤细胞耐药及敏感性起到了一定的辅助作用，但多数检 测方法在临床实践中存在各种各样的缺陷，限制了临床应用。由于近年来分子生物学检 测的普遍应用，不少学者对耐药基因在肺癌耐药中的作用进行了深入的研究，但耐药基 因与肿瘤药物敏感试验之间关系方面的研究却十分少见，本文为深入了解肿瘤药物敏 感检测与肺癌耐药基因表达之是的关系，对48例非小细胞肺癌肿瘤标本进行了肿瘤药 物敏感试验，同时对同一标本检测了肿瘤耐药MDR—I、GST一“、MRP基因的表达。以希 明确耐药基因表达与肿瘤药物敏感之间是否具有相关性及临床指导意义。 材料与方法 一、研究对象 大套袭言 上海市医学会2002年肺科学术年会 切除标本送实验室行肿瘤药物敏感检测，同一新鲜手术标本抽提肿瘤组织RNA(RT— PCR方法)检测MDR—I、GST一Ⅱ、MRP基因的表达。 二、病例选择标准：所有病例均有组织学诊断，组织学标本行常规病理检查。主要脏 器功能障碍能够难受手术，KPS80。 x片，纤维支气管镜检查，胸部、腹头颅CT，骨ECT扫描。 三、耐药基因检测 (一)手术标本或活梭标本30mg加DNA提取液(10mm ton)200ul，10％SDS 10ml，蛋白酶K 10ml(20mg／m1)消化水浴50℃，2小时。 (二)RNA样品处理度剂盒(华美生物公司)分离提取膜板RNA。 5Xbuffer lmlRNASIA (三)制备cDNA反应液，总RNA 2ul，10mM 1-5ug Dntp (40U／m1)0．5ul随机引物0．5ulAMV(9u／m1)o．3ul加3滴水至10m1． Ⅱ、MRP试剂盒(军事医学科学院)。 cDNAlul 反应液：混合PCR液17ml，2ulTaq酶。 x30 55℃30sec72℃lmin (五)MDR—I、GST一Ⅱ、扩增参数：94℃3min，94℃30sec X 55℃30sec72℃lmin 个循环。MRP(336bp)扩