益心舒对肾性高血压大鼠左室肥厚和c-fos、c-my基因表达的影响.pdfVIP

仲景学术探Ut ● ● 益心舒对肾性高血压大鼠左室肥厚及C-lOS、c—my基因表达的影响 李敬孝张茗 黑龙江中医药大学150040 高疵压左心室肥厚(LVH)作为心血管疾病的独立危险因素之一，已经引起了人们的广泛重视。随着LvH的 发生发展，患心肌缺血、严重心律失常、心力衰竭和摔死的概率也在增加。因此。逆转LVH经成为降低心血管 疾病死亡率的重要课题，亦是评估降压药疗效的一个极为重要的依据。高血压I，vH的发病机制较为复杂．近年 来有许多学者观察到一系列高血压相关基因的异常表达在这一机制中起重要作用，高ffltJ玉,LVH的形成和发展 细胞形态参数、心肌细胞原癌基因c—f。s、c—m弦的表达，对自拟中药复方益心舒的治疗作用作出结论。 1．实验材料 1．1实验动物 每日光照12h。自由摄食、饮水。 1．2受试药物及制备 (购于黑龙江省药材公司)。上丸眯，加8倍量水授泡4h。加热煎煮lh，过滤，药渣再加6倍量水。煎煮】h。过滤．两次 、 滤液混合，浓缩制成浓度为l：1(即lml水煎剂含19生药)的水煎剂备用。 片含卡托普利12．5mg，临床为日服用药，成人口服25—100mg，一丑2-3次。 1．3主要实验试剂 1．3．1c—myc、c-los免疫组化试剂盒北京中衫金桥生物技术有限公司 1．3．2--步法免疫组化检测试剂北京中衫金桥生物技术有限公司 1．3．3多聚赖氨酸北京中衫金桥生物技术有限公司 1．3．4浓缩型DAB试剂盒北京中衫金桥生物技术有艰公司 1．4主要实验仪器 1．4。1DESN—II多通道动物无创测压仪南京赛德生物技术有限公司生产 1．4．2透射电镜显微镜TECiNAI—G2荷兰 1．4．3奥林帕斯多功能显微镜日本 1．4．4TG328A型电子分析天乎上海天平仪器厂 1．4．5【MS一2B二导生理记录仪成都仪器厂生产 2．实验方法 2．1造模方接 240 固，实验研究篇 Goldblott高血压大鼠模型两肾一夹型(2K1 多通道动物无创测压仪测量大鼠尾动脉的收缩压3次，取平均值作为手术前的正常Jfn压,。测压后，称重。用2％ 戊巴比妥钠40mg／kg腹腔注射麻醉，仰卧位固定，剃去腹毛，常规消毒，从第10胸椎到第3腰椎沿正中线切开皮 钳夹左肾动脉，使左肾动脉部分狭窄，右肾不触及，分层关闭腹腔。术后3d内舰注青霉素iO万单位，只，以防感染。 2．2分组方法 80只大鼠随机选取10只作为空白组．其余70只大鼠进行肾动脉缩窄术。术后第4w大鼠血压趋于稳定．凡收 中剂量组、益心舒低剂量组、西药开博通组。 2．3给药剂量 g，Icg；高剂量组 益心舒按正常成人(70kg体重)与太鼠给药剂量系数折算：低剂量组8．779／kg；中剂量组17．55 35．1 验期间各组均饲以普通饲料，并自由饮水。 3．指标测定与方法 3．1大鼠一般状态 包括精神、饮食、毛色、体重等。 3．2大鼠的收缩压 采用DESN—II多通道动物无创测压仪在大鼠清醒状态下测尾动脉收缩压。R{问均选在下午灌胃后。 3．3LvⅣ．LVW／BW羽／定 动物处理前记录其体重(Bw)，开胸取出心脏，去除大血管残根，心房及右心室游离壁，保留室间隔及左心室， 3．4心肌细胞形态参数分析 采用HPIAS一1000型医学彩色全自动图像分析仪系统对大鼠心肌细胞的面积、周长、平均直径的分析．作为 评价左心室肥厚程度的指标。 3．5c—fos、c—myc原癌基因免疫组织化学方法 4．结果 4．1大鼠一般状态观察：实验结束时．各组均存活】0只。整个实验期闻，模型组及高剂量组大鼠后期毛色逐渐 失去光泽，状态萎靡．行动迟缓，倦卧。体重明显减轻，个别出现脑出血表现；而空白组、中剂量组、低剂量组、开 博通组大鼠毛色有光泽。双眼灵活有神，行动敏捷