己糖激酶在肿瘤治疗中运用.docVIP

己糖激酶在肿瘤治疗中的运用 班 级：生物技术1301 学 号：201307004134 作 者：龙岳锋 摘要 肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失掉了对其生长的正常调控，导致异常增生而形成的新生物。这种新生物常形成局部肿块，因而得名。在己糖激酶催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)与ADP。它在肿瘤组织中表达的量及活性的增加,使得肿瘤组织在乏氧的情况下,仍能保证足够的能源,并且糖酵解的许多中间产物可以被瘤细胞所利用,用来合成蛋白质、核酸及脂类等，从而为瘤细胞本身的生长和增生提供了必需的物质基础己糖激酶是催化己糖使之磷酸化的酶，它是糖酵解途径的第一个酶,也是糖酵解途径的限速酶。在哺乳类动物的体内，一共有四种亚型的己糖激酶 (HK～)，它们各自有一定的组织特异性。型主要存在于脑组织中，型是胰岛素敏感型的，主要存在于脂肪及肌组织中。除上述几种组织外,、型在其他各种组织中亦有少量的表达。型在肝、肾和肠组织中有微量的表达。HK仅在肝和胰中存在，也就是我们所熟知的葡萄糖激酶，把它称作HK有一定的误解，因为它可使其他的己糖磷酸化。实验证实在四种HK的同工酶中, HK Ⅱ与肿瘤相关性最大。Sebastian和Kenkare[3]通过RT的方式发现很多肿瘤细胞系中都有HK Ⅱ RNA的诱发和过表达。HKⅠ RNA也有不同程度增加。至于HKⅣmRNA,只在肝和胰腺肿瘤中有发现,且亲和力低。 ??? 现已有很多关于肝癌组织中HK表达水平的研究，这些研究表明肝癌的发展同时伴有HKⅣ转化成HKⅠ和，并且其活性及其与线粒体结合(即己糖激酶的微粒形式)的比率都有增加。? 在鼠肝癌的模型中发现,正常肝细胞中的HKⅣ会被另一种催化反应速度的HK所代替。这种新型的HK并没有在肿瘤的前期病变（透明细胞性、嗜碱细胞性、混合细胞性病灶）中出现，这一点说明它的基因转换只在混合细胞病灶/癌变阶段出现。HKⅡ可以由疏水作用色谱分成两种亚型(HKⅡa and ，它们的比率可随转化阶段的不同而改变，在分化好的瘤细胞中HKⅡa会更高一些。在苯基—琼脂糖凝胶上可通过疏水作用色谱将Morris肝癌细胞中的HKⅡ分成两种亚型。HKⅡb在胞浆和与线粒体结合的形式(即微粒型)中都是占绝对优势的，不过Ⅱb∶Ⅱa的比率在微粒形式中(6～8)要高于胞浆中(1.5～2)。HKⅡa 和 HKⅡb的分子量都是110千道尔顿，但是它们的酶催化反应速度常数以及在G6p和1,6二磷酸葡萄糖作用下的抑制常数是不一样的。利用Northern blot的方法可以发现HKⅡ有两种不同的mRNA转录子，这也说明HKⅡa and –Ⅱb是起源于不同的RNA转录和/或处理。 HK尤其是HK Ⅱ对于快速生长的肿瘤的代谢行为来说是至关重要的。HKⅡ表达的增多， 从基因水平上而言，首先是其基因复制的增多。 Rempel等[10]在鼠肝癌细胞系AS－30D中证实HKⅡ基因的拷贝数比正常的鼠肝细胞增加5～10倍。限制片断长度多态性分析表明HKⅡ 基因并没有重排，这也就说明基因数量的增多是建立在原基因稳定扩增的基础上的。就基因水平,另一个重要的原因就是HKⅡ的启动子有广泛的信号转导级联激活途径。AS中HKⅡ启动子可以被胰岛素，乏氧环境及佛波酯所激活，这也说明肿瘤中HKⅡ启动子的信号转导级联途径是比较混乱的[11]。HKⅡ的启动子也可由突变型的p53反式激活。 p53亦可以通过突变而减弱对细胞周期的控制，因此而进一步促进HK基因的转录。ＨＫ Ⅱ的基因启动子附近的一个狭小区域中富含各种反应元件,它们可以分别和Sp1、Sp2、Sp3、CREB及 NFY等蛋白结合,使启动子活化。这段序列对于肿瘤中HKⅡ的过表达有着重要的意义[12]。 另有一些实验表明缺氧诱导因子1α(HIF与HKⅡ的水平是密切相关的[13]。 在肝癌细胞ＨＫⅡ的基因启动子的远端有两个可结合缺氧诱导因子的区域,且在缺氧的环境下, ＨＫⅡ启动子的活性可增加到三倍。 HK是唯一的一种和线粒体结合的酵解酶，锂可以使HK从线粒体上分离出来，从而抑制B16黑色素瘤细胞的增生，亦为药物治疗提供了新的方向[17]。Summary Is the body in a variety of tumor oncogenic factors, local tissue cells at the gene level lost its normal growth regulation, lead to abnormal proliferation and the formation of new organisms. This new biological often form local mass, hence th