猪细小病毒分子生物学诊断技术和基因工程疫苗的研究进展.pdfVIP

-54· 第四届南京农业大学畜牧兽医学术年会论文集 猪细小病毒分子生物学诊断技术及 基因工程疫苗的研究进展 谢巧1”，李春华2’ (1．江西农业大学动物科技学院，江西南昌330045； 2．上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海201106) 摘要：猪细小病毒(porcine 对猪细小病毒研究的不断深入，目前已经基本阐明了PPV的抗原性、组织嗜性、基因组、转录图谱和翻译图谱等，在病毒诊断技术、疫苗研制等 方面取得了很大的成就。本文综述了猪细小病毒的最新分子诊断技术及基因工程疫苗的研究进展。 关键词：猪细小病毒；分子诊断技术；基因工程疫苗 常规血清学诊断技术有：血凝和血凝抑制试验(HA— 猪细小病毒(porcineparvovirus，PPV)属于细 小病毒科细小病毒属成员，是一种自主复制型病毒。 HI)、对流免疫电泳技术、胶体金染色法、酶联免疫 该病原的基因组为单股线状负链DNA，大小约为 吸附试验(ELISA)和单克隆抗体技术等。随着分子 5000 bp，共编码3种结构蛋白VPl、VP2、VP3和3 生物学的飞速发展，近年来PPV分子诊断技术得到 种非结构蛋白NSl、NS2、NS3。PPV毒株按致病性 了充分的发展，建立了PCR检测技术、核酸探针技 与组织嗜性可分为4个类型：第1类以NADL培株为 术等，具有快速、高敏感性和特异性强等特点。 代表，为强毒株，口服接种可以穿过胎盘屏障，导致 1．1 PCR检测技术 胎儿感染，形成病毒血症；第2类以NADL-2为代PCR技术是指设计特异性的引物在体外扩增特 表，为弱毒株，口服接种不能穿过胎盘屏障，对妊娠 异DNA片段，与电泳技术相结合的方法，其特异性 母猪和胎儿都没有致病性，不形成病毒血症，可以当 强，敏感性高。国内刘俊辉等嵋。以PPV的VP2基因 作弱毒疫苗使用来防制PPV感染。NADL-2株通过子 作为模板设计了一对引物，成功地从PPV兔体传代 宫内接种，与NADL-8株一样，有复制和感染能力， 的组织及其细胞培养物中扩增出了312 bp的特异性 并可导致胎儿死亡；第3类以Kresse株为代表，为皮 片段。敏感性试验表明，PCR扩增可以检测出104 炎型强毒株，可以致死免疫不充分的胎儿。据报道其 TCID∞的病毒含量。赵俊龙等旧1在PPV基因组的上 毒力与NADL-8相似或较强；第4类以AF-83株为代 游设计了l对引物，从猪细小病毒感染的组织和细胞 表，为肠炎型毒株，其主要引起肠道病变，与猪的腹 中扩增出445bp片段，回收该片段用EcoRI酶切， 泻有关。虽然已经分离出多种类型的PPV毒株，但 得到了125 bp和320bp2个片段，证实了该扩增片 目前认为只有一个血清型。 段的特异性，该方法可以检测出10一TCID蚰的病毒含 猪细小病毒感染主要引起母猪繁殖障碍，尤其是