蛋白质修饰的电化学研究.pdfVIP

第 18卷 第2期 电化学 V01．18 No．2 2012年 4月 JOURNALOFELECTROCHEMISTRY Apr．2012 文章编号：1006—3471(2012)02~097—11 蛋 白质修饰的电化学研究 赵 婧 ，朱小立 ，李根喜 ， (1．上海大学生命科学学院，上海 200444； 2．南京大学 医药生物技术国家重点实验室，生物化学系，江苏 南京210093) 摘要： 蛋白质的翻译后修饰对于生命体执行正常的生理功能具有十分重要的作用，是蛋白质科学研究的重 要内容．目前研究蛋白质修饰的方法主要有质谱法 、亲和层析等，然而由于蛋白质修饰研究的复杂性 ，迫切需要 发掘新的技术手段．电化学方法理论成熟 、应用广泛，在生命科学许多领域发挥着越来越重要的作用．蛋白质的 体外修饰必将导致蛋白质特定位点基团的变化，可以利用巧妙设计的电化学方法予以表征和分析，以期探明修 饰对蛋 白质结构和功能的影响．此外，又可以利用 电化学定量分析的独特优势快速准确地测定蛋 白质修饰中涉 及的相关酶活．正因为如此，蛋白质体外修饰的电化学研究已引起越来越多的关注．本文以作者课题组近期研究 工作为主，结合国内外同行的相关代表性工作 ，介绍电化学方法在蛋白质修饰方面的近期研究进展，并探讨了今 后的发展方向和趋势． 关键词 ： 蛋白质修饰；蛋白质电化学；生物电化学 中图分类号 ： 0657．1 文献标识码 ：A 蛋白质的翻译后修饰指的是新合成的多肽及 饰，其鉴定或检测方法各不相 同．用于蛋 白质糖基 蛋白质在特定位点上所做的化学修饰 ，包括磷酸 化修饰检测的常用方法有放射性标记法、分子荧 化、乙酰化、甲基化、泛素化、糖基化、脂基化等 ¨J． 光标记法、电泳法、凝集素标记法、抗体标记法及 翻译后修饰使蛋 白质的结构更加复杂多样，功能 化学酵素法等．而对蛋 白质磷酸化修饰的检测，也 更为完善专一，机体调节也更精巧细致，对于生命 有很多成熟的方法，包括 P放射性标记、毛细管电 体执行正常的生理功能具有十分重要的作用，因 泳、荧光标记、同位素编码亲和标签等方法．至于 而成为蛋 白质科学研究的重要 内容 ．另一方面， 其它类型的蛋 白质修饰的鉴定，可供选择的方法 倘若上述复杂的修饰过程一旦失去了控制，那么 不多，致使相关后续研究受到许多限制．更何况， 细胞的新陈代谢甚至个体的整体调控就会发生紊 涉及 内源性蛋 白质修饰的分析，首先又必须清楚 乱，产生致命的后果．研究表明，多种疾病包括癌 蛋白质的体外修饰条件，这就非常迫切期待建立 症、糖尿病、代谢综合症和神经综合症的发生都和 各种蛋 白质修饰的模型以便配合体外多角度的研 蛋 白质的异常修饰有着不同程度的相关性 』．因 究和分析，同时也有助于开发新的检测方法，为蛋 此，研究蛋 白质的修饰不但有助于深入了解蛋 白 白质修饰的后续研究创造有利条件． 质的结构和功能，而且对于各种疾病发病机理的 电化学技术 由于理论成熟、操作相对简便且 探求也有着十分重要的意义． 快速灵敏，已逐渐发展成为生命科学研究中一种 有关蛋 白质修饰的研究大致包括如下几方 重要的分析方法．尤其是随着蛋 白膜伏安法的 日 面：蛋 白质修饰的鉴定、修饰蛋 白质的分离纯化以 益成熟，越来越多带有 电活性中心的蛋 白质可借 及其结构表征和功能检测等．其 中，蛋 白质修饰的 助于各种膜