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维普资讯 第21卷 第 4期 病 毒 学 报 Vo1.21 NO.4 20 0 5年 7 月 CHINESEJOURNAL Q July 2005 蛋鸡 J亚群禽 白血病的分子生物学诊断 徐镔蕊 ,董卫星 ,余春明 LucyF.Lee ,MaoxiangLi (1.中国农业大学 动物医学院 ,北京 100094;2.安徽省农业委员会畜牧局,合肥 230001; 3.AvianDiseaseandOncologyLab.USDA.EastLansing,MI 48823,USA) 摘要:根据 J亚群 白血病病毒 (ALV—J)原型株HPRS-103的序列设计了一对针对外源性ALV—J引物H5和 H7,从发 生ML病死鸡的肿瘤 、骨髓 、肝脏、脾脏和输卵管组织中提取 DNA作为模板 ,经 PCR扩增得到长度为 545bp的片 段,对其序列进行测定后 ,与ALv—J原型株 HPRS-103的序列进行了比较,发现其核苷酸同源性为 97.4%,所编码 氨基酸的同源性为 96.1%。该片段含有 ALV—Jgp85编码基 因的部分序列和 ALV—Jpol基因的部分序列,从分子 水平上证实了蛋鸡发生J亚群禽 白血病,进一步证明了此前根据病理学观察、免疫组化及免疫荧光诊断的结果。 这是首次从分子水平上证 明蛋用型鸡发生J亚群禽 白血病 。 关键词 :蛋鸡 ;J亚群禽 白血病 ;分子生物学诊断 中图分类号 :S858.31;S852.659.3 文献标识码 :A 文章编号 :1000—8721(2005)04—0289—04 禽 白血病病毒 (ALV)属于禽 C型反转录病毒 传染性疾病,徐镔蕊等通过病理学观察L9J、利用单 属 ,多数情况下,禽 白血病是 由外源性的A和 B亚 克隆抗体进行免疫荧光检测 ,将其诊断为蛋用型鸡 群病毒引起 ,C和 D亚群很少引起 自然发病。E亚 J亚群禽 白血病,这是世界范围内首次从蛋鸡 中发 群病毒通常在鸡群 中以内源性病毒的形式存在,致 现J亚群禽白血病 1【0J。尸体剖检可见病鸡卵巢、输 病性很 低…1。J亚群禽 白血病 病毒 (ALV—J)是 卵管发育不 良,有 的蛋鸡甚至到产蛋 日龄时输卵管、 Payne于 1989年首次从 肉鸡群 中分离 出来 的L2J, 卵巢呈幼稚型,卵巢组织充满大量的胞浆及圆形嗜 ALv—J可通过垂直传播和水平传播引起成年 肉鸡 伊红的特征性肿瘤细胞 11j。这是导致鸡群产蛋率 骨髓细胞瘤,导致很高的死亡率、肿瘤发生、生产性 低的直接原因,给蛋鸡业造成很大的经济损失 。蛋 能降低、淘汰费用增加等,造成 肉鸡饲养业的严重损 鸡J亚群禽 白血病的发现 ,为探讨影响产蛋性能疾 失。关于本病的诊断方法有很多,如病毒分离、免疫 病的研究开启了新思路 。为了从分子水平上进一步 组化 3、原位杂交[]以及 PCR技术[5,6]等。杜岩等 验证这一诊断结果 ,进行 了本项研究。 2000年在国内首次从商品代 肉鸡 中分离到了ALV— JL7j。ALV—J囊膜糖蛋 白基因删 gp85与其它亚群 材料与方法 ALV相比,缺少 93~126个碱基对 ,与其它 A—E亚 1 样品 分别从我国北方某地来 自一个种鸡场的7个养鸡 群 ALV的删 gp85基因只有 40%的同源性 ,而 A— 场采样 ,每个鸡场采 3只,每只鸡取病理学诊断为 ML病鸡 E亚群间的同源性

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