马传染性贫血弱毒疫苗株致弱过程中不同代次毒株膜表面蛋白gp90进化分析.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集 马传染性贫血弱毒疫苗株致弱过程中不同代次毒株的 膜表面蛋白gp90进化分析 王雪峰12，王帅-，林跃智1，姜成刚1，吕晓玲1，赵利平-，王凤龙2，周建华卜 (1，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物重点实验室／大动物病研究室，黑龙江哈尔滨150001； 2．内蒙古农业大学兽医学院．内蒙古呼和浩特OlOOlS) 摘 要：慢病毒的表面蛋白(su)基因gp90是病毒基因组变异最为显著的区域，该蛋白不仅是病毒与细胞受 体结合的区域，也是病毒诱导机体产生免疫保护的主要抗原成分。本研究对中国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫 毒株的进化距离更为接近，它们与亲本毒株处在进化树的不同分支。与体内来源的强毒株相比，适应白细胞培养 弱毒疫苗减毒机制提供重要参考。 关键词：马传染性贫血病毒；gp90；进化分析 infectiousanemia多传代后得到一株致病力更强的驴体强化毒株 马传染性贫血病毒(Equine virus，EIAV)是反转录科慢病毒属成员，其主要感 染马属动物，引起感染马匹以发热，贫血，消瘦为 续在体外培养的驴白细胞上进行120多代后获得了 主要症状的传染性疾病一马传染性贫血。多数EIAV 感染马在经历急性期和慢性期后，最终形成隐性感 仅可以诱导免疫马匹产生抵抗同源致病毒株的攻 染状态，病毒呈低水平复制状态，机体终身带毒。 击，而且对美洲毒株等异源强毒株的攻击也具有较 这显示了EIAV能诱导机体产生有效的免疫反应从强的保护能力‘21。 而控制病毒的复制，因此，EIAV被认为是研究慢 在EIAV弱毒疫苗研制过程中形成一系列毒力 病毒病毒复制与机体免疫控制机制的独特模型”。 不同的病毒毒株，对这些毒株基因组的分析，有助 20世纪70年代中国科学家通过独特的路线对于明确EIAV弱毒疫苗的减毒和诱导免疫保护机理。 EIAV强毒株进行致弱，获得了马传染性贫血弱毒EIAV的表面蛋白gp90是病毒与靶细胞受体结合的 疫苗。该疫苗是唯一大规模使用的慢病毒疫苗，为 主要区域【3】，同时也是影响病毒毒力和刺激机体产 其他慢病毒病疫苗的开发提供了借鉴。EIAV疫苗生免疫保护的主要成分f41，在对EIAV基因组的进化 的弱化起始毒株EIAVLN40是由分离于辽宁省的野 分析研究中，gp90成为主要的靶基因[4-s]。本研究对 生致病毒株EIAVLiao连续在马体传代16代次形成 的马强毒株。随后，EIAVLN40在驴体内经过116在驴白细胞传代过程中的3个中间代次毒株(第32 作者简介：王雪峰(1982．)，男，内蒙古卓资县人，博士研究生，主要从事分子病毒学和动物传染病病理研究． ·通信作者：E-mail：jianhua_uc@126．COITI． -243- 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集 代次毒株EIAVDLV32，第62代次毒株EIAVDLV62 2 结 果 和第92代次毒株E1AVDLV92)的gp90序列进行了 分析，发现了一些EIAV弱毒疫苗致弱过程中gp90 2．1 EIAV减毒过程中gp90核苷酸序列进化分析 的重要进化特点，有助于进一步探讨马传贫弱毒疫 苗的减毒机制。 毒株的前病毒基因组中扩增获得了完整的gp90序 1 材料和方法 列，各毒株的克隆数分别在15～24个之间。利用 1．1 病毒株EIAV马强毒株(EIAVLN40)、EIAV 遗传进化树(图1o结果显示：EIAVLN40、