刘小芳：番茄抗病毒相关基因eIF4E的遗传转化研究.pdf

华中农业大学学士学位论文（设计） 学士学位论文 题 目 番茄抗病毒相关基因 eIF4E 的遗传转化研究 姓 名 刘小芳 学 号 20020610024 专 业 园 艺 指导教师 叶志彪 职 称 教授 I 华中农业大学学士学位论文（设计） 中国·武汉 二○○六年六月 目录 摘 要 III 关键词 III Abstract III Key words III 前言 4 1 材料和方法 5 1.1 植物材料5 1.2 细菌菌种及培养5 1.2.1 农杆菌5 1.2.2 农杆菌的培养5 1.3 转化及培养方法6 1.3.1 外植体准备6 1.3.2 转化及再生6 1.4 转化再生植株的鉴定6 1.4.1 转化植株PCR 检测6 1.4.2 转化植株的生物检测 (病毒接种鉴定) 7 2 结果与分析 7 2.1 番茄子叶的转化及卡那霉素抗性植株的再生 7 2.2 转化再生植株的PCR 检测结果7 2.3 转基因植株的病毒接种鉴定结果9 3．结论和讨论 9 参考文献 10 致 谢 12 II 华中农业大学学士学位论文（设计） 番茄抗病毒相关基因eIF4E的遗传转化研究 摘 要 以A53和中蔬五号番茄子叶外植体，通过与含质粒pBI-4E-leS 的根癌农杆菌共培养进行遗传转化。 获得15株卡那霉素抗性植株并在温室中进行培育。通过PCR对转化植株进行分析，表明eIF4E基因整 合进番茄基因组中。利用摩擦接种法对转基因植株进行PVY和CMV两种病毒的攻毒感染。结果表明， 转基因植株与未转化株相比，呈现出不同程度的抗病力。 关键词 番茄； 遗传转化； PCR ； 病毒接种； PVY ； CMV Preliminary research on tomato genetic transformation with virus resistance-related gene eIF4E from tomato Abstract Cotyledon explants of A53 (Solanum lycopersicum cv. A53) and Zhongshu No.5 tomato were transformed by co-cultivation with Agrobacterium containing pBI-4E-leS construct. Fifteen kanamycin-resistant transformants were regenerated and established in glasshouse. Transgenic plants obtained were screened by PCR, which confirmed the incorporation of the gen