甜樱桃体细胞胚胎发生及植株再生的研究.pdfVIP

甜樱桃体细胞胚胎发生及植株再生的研究 吴雅琴，赵艳华，刘国俭，李春敏 （河北省农林科学院昌黎果树研究所 昌黎 066600） 摘要：以甜樱桃 ‘红灯’为材料，幼果用0.1%HgCl2 进行消毒，在无菌条件下取出未成熟胚子叶进行诱导， 在胚成苗后进行继代和生根培养。培养结果表明：以MS为基本培养基，在2,4-D为2.0mg/L 时培养基上胚性 愈伤组织诱导率较高，为53.7%; 愈伤组织经过数次继代后转移至MS附加6-BA 1.0mg/L和NAA0.1 mg/L培养 基上可诱导体细胞胚的形成, 诱导率可达81.0%.体细胞胚在合适的培养基上可继续生长和增殖。 关键词： 甜樱桃；愈伤组织；体细胞胚胎；植株再生 Somatic embryogenesis of sweet cherry and plantlet regeneration WU Yaqin , ZHAO Yanhua, LIU Guojian, LI chunmin (Changli institute of Pomology,Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences changli 066600，China ) Abstract: Cultivars sweet cherry ‘Hongdong’ was used as the materials. An immature pterodia was taken from young fruit disinfected with 0.1% HgCl . Shoot multiplication culture and rooting 2 culture were conducted after emergence of seedlings. The result indicates that the embryogenic callus(EC) frequency was 53.1.% at 2 mg/L of 2,4-D added in MS medium, After subcultured for several times , somatic embryogenesis at high f requency (81.0%) was obtained on MS medium supplemented with 6-BA 1.0 mg/ L + NAA 0.1 mg/ L. Somatic embryos can keep on growing and proliferating on appropriate medium. Key words: Sweet cherry; callus; somatic embryogenesis; plantlet regeneration 随着人们生活水平的提高，果品市场对甜樱桃的需求也不断提高，其栽培面积不断 扩大，常规育种方法已不能满足现代化农业对甜樱桃品质的要求。随着生物技术的发展，为 [1-3] 果树新品种的选育提供了新的手段 。目前，国内外已有许多关于果树的体细胞胚发生和 [4-13] 植株再生方面的研究报道 。诱导体细胞胚形成再生植株是果树组织快速繁殖的一个重 要、有效的途径，它以繁殖系数高、周期短、结构完整等优点而被广泛采用。本文研究了甜 樱桃体细胞胚的发生及植株再生，为进一步建立甜樱桃离体再生系统和快繁体系打下基础， 从而为种质改良和遗传转化提供科学依据。 1 材料和方法 1.1 试验材料 供试品种为自然授粉的甜樱桃 ‘红灯’，未成熟幼胚子叶。 1.2 试验方法 1.2.1 无菌外植体的建立 取花后35 天生长良好的幼果，经75%的乙醇表面灭菌2~3min, 用无菌水冲洗3 次，放入0.1% HgCl2 溶液中消毒9min，用无菌水冲洗4~5 次。在无菌条件 下，用解剖刀片将种子切开，将未成熟幼胚子叶取出接种在9 种含有不同激素的MS 培养基 上 （附加3.