细胞染色.pptVIP

细胞染色 ｜简单染色法｜革兰氏染色法｜荚膜染色｜负染色法｜抗酸性染色法｜芽胞染色法｜ * 简单染色法 步骤 将菌制备成玻片，各玻片于染色前需先经过热固定。 将玻片置于染色盘上，覆以染色液，并注意适宜的染色时间。 以蒸馏水尖嘴瓶小心沖去过剩染色液，此时玻片应与水流成平行，如此可减少微生物自抹片中流失。 以吸水纸吸干抹片，切勿揩拭。 以油镜观察抹片。 革兰氏染色法(Gram stain) 步骤 吸干玻片。 以无菌操作，每菌分別置备一抹片之外，另Escherichia coli及Staphylococcus aureus混合置备一抹片。于空气中干燥，热固定后备用。 将涂抹覆以结晶紫，靜置一分钟。 以蒸馏水轻洗。 覆以革兰氏碘液媒染剂，静置一分钟。 以蒸馏水轻洗。 以95%乙醇脱色，勿脱色过度，逐滴滴下至发现结晶紫未自涂抹中释出为止。 以蒸馏水轻洗。 以番红复染45秒。 以吸水纸吸干，並用油镜观察。 荚膜染色法(capsule stain) 步骤 擦镜玻片，以无菌操作制备一浓厚涂抹，于空气中干燥后备用。 将玻片覆以结晶紫，并静置5-7分钟。 以20%硫酸铜溶液轻洗。 以吸水纸擦干，并以油镜观察。 负染色法(negtive stain) 步骤 取一小滴苯胺黑染色液，滴于洁净玻片之一端。 以无菌操作取一接种环的培养菌种，置入苯胺黑染色液中，混勻。 取另一玻片其一端置于苯胺黑色液之前，并呈30度状态，向他端推去，使混和液成一薄涂膜。 将玻片置空气中干燥，不宜以热固定。 以油镜观察之。 抗酸性染色法(acid fast stain) 步骤 擦净玻片。 以无菌操作，每菌分別制备一抹片。于空气中自然干燥，并加以热固定。 将涂抹覆以石炭酸复紅，置溫热之电热板上，使蒸热約五分钟。注意勿使染液蒸发，需要时补充之。并调节电热板至适宜溫度，以防沸腾。若用不加热法，可將涂抹覆以含有Turditol之石炭酸复紅，染色3-5分钟。 將玻片放置冷却，而后以蒸馏水轻洗之。 逐滴加入酸性酒精脱色之，至无石炭酸复紅洗出为止。 以甲烯兰复染2分钟。 以蒸馏水清洗之。 以吸水纸擦干，并用油镜观察。 *