重组胰高血糖素样多肽2对烧伤大鼠肠黏膜的保护作用.pdfVIP

维普资讯 维普资讯 ChinJBurns,August2007,Vo1．23,No．4 中华烧伤 杂志2007年 8月第 23卷第 4 — — 1 材料 与方法 壳质量。计算肠黏膜与肠段及躯壳质量之 比。 1．1 试剂来源及模型制作 1．3．3 肠黏膜蛋 白含量测定 将肠黏膜放入匀 1．1．1 试剂来源 重组 GLP一2由本实验室基 因 浆器加入 1ml等渗盐水匀浆，按二辛丁酸蛋白检测 重组获得。化学合成的GLP一2纯度为 98％，序列如 试剂盒 (美国Pierce公司)说明书操作。同时绘制校 下 ：HADGSFSDEM NTILD NLAAR DFINW LIQTK 正 曲线 ，计算蛋 白含量 。 ITD，委托美国多肽公司合成，低温冷冻干燥，分装 ， 1．3．4 组织学观察 用体积分数 10％甲醛 固定 临用前加入等渗盐水稀释 。 空肠组织 ，常规脱水 、石蜡包埋 、沿肠腔纵 向切片 ， 1．1．2 模 型制作 24只 SD大 鼠由第三军医大 HE染色 ，光学显微镜下观察、照相 。 学野战外科研究所动物室提供 。动物许可证 ：医动 1．4 统计学处理 字第 310101017号 。雌雄各半，体质量 (200±20)g。 数据 以x4-S表示 ，用 SPSS13．0统计软件行单 参照文献 [4]方法致大 鼠背部 30％TBSAIII度烧伤 ， 因素方差分析及组 问两两 比较 。 伤后立即经腹腔注射乳酸林格液 (40ml／kg)抗休 克，给予正常饮食。 2 结 果 1．2 实验分组 2．1 肠黏膜通透性 按随机数字表法将大 鼠分为 4组 ，每组 6只。 与正常对 照组大 鼠肠黏膜通透性 [(0．192± 正常对照组 ：自由饮食 ；烧伤对照组 ：单纯烧伤后 自 0．012)mg／m1]比较 ，烧伤对照组明显升高 [(0．350± 由饮食 ；重组 GLP-2治疗组 (重组治疗组 )：伤后 4h 0．040)mg／ml，P 0．O1]。给予重组 GLP一2及合成 ∞ ∞ 如 m 苦I0 皮下注射重组 GLP一2，100nmol·kg～ ·d～；化学合 GLP一2后 ，肠 黏膜通透性 分别 为 (0．250±0．026)、 成 GLP一2治疗组 (合成治疗组)：更换药物，其余同上。 (0．2434-0．008)mg／ml，与烧 伤对照组 比较明显下 采集正常对照组及其他各组伤后 7d标本检测。 降 (P 0．O1)。给予 2种 GLP一2的组 问比较 ，差异 1．3 检测指标 无统计学意义 (P 0．05)。见图 1。 1．3．1 肠黏膜通透性检测 采用异硫氰酸荧光 ： 素葡聚糖 (FITC-D，美 国Sigma公司)标记荧光法 ，用 ∞ 磷酸盐缓 冲液 (PBS，pH7．2)配制 FITC—D为 0．25 粪 mg／ml。剖开大 鼠腹腔 ，取距 回盲部 5cm左右的 10 瀑 cm末段 回肠，两端结扎 时勿损伤血管，注入 FITC—D 0．5ml。30min后取 门静脉血 1ml，2000×g离心