4急性肝功能衰竭大鼠降钙素原与肠黏膜屏障的关系.pdfVIP

·基础论著· 急性肝功能衰竭大鼠降钙素原与肠黏膜 屏障的关系 陈景丹 李运华 朱坚胜 朱敏赵海红 刘均艳 (3 failure，AHF) 急性肝功能衰竭(acutehepatic mL／kg)腹腔注射麻醉，剖开腹腔，门静脉采血， 是一种临床症状严重、病情进展迅速、病死率高的 分离血清，一70℃冻存备用；距回盲部2cm处取 临床综合征，其发病机制复杂。目前认为，肠源性 一长约1cm回肠，纵行剖开，以0．9％氯化钠溶液 内毒素血症在AHF发病中起重要作用[1]。降钙洗净，4％中性甲醛溶液固定。 素原(procalcitonin，PCT)是一种继发性炎性介2．主要指标及检测方法：全自动生化分析仪 质，内毒素(ET)是其合成的主要诱导剂。本研究 建立AHF大鼠模型，分析AHF大鼠的PCT水平 变化并探讨其与肠黏膜屏障的关系。 明书操作，分光光度法测定D-LAC。 3．病理检测：回肠组织常规脱水，石蜡包埋 材料与方法 切片，HE染色，光学显微镜下观察。 一、实验动物 四、统计学方法 应用SPSS 清洁级SD大鼠45只，雄性，体质量(200± 12．0进行统计分析，数据以膏土s 20)g，购自浙江省实验动物中心。 表示，两组间数据比较采用独立样本t检验，相关 二、主要试剂及药物 有统计学意义。 硫代乙酰胺(TAA)购自上海晶纯试剂有限公 司，PCT、ETELISA试剂盒购自武汉中美科技有 结 果 限公司，IL-6、TNF-aELISA试剂盒购自美国 一、一般表现及病死率 Invitrogen公司，二胺氧化酶(DAO)试剂盒购自 南京建成科技有限公司，n乳酸(DLAC)购自美 健康对照组大鼠一般状态良好，活动自如，反 应灵敏，自由取食，大小便正常，造模开始后48h内 国Sigma公司，D乳酸脱氢酶购自日本Wako公 24h后出 司。 均无死亡。AHF组大鼠腹腔注射TAA 现反应迟钝，精神萎靡。进食减少，四肢无力，体质量 三、实验方法 48 减轻。注射1AAh后上述症状加重，并出现反 1．动物分组、造模及标本采集：将45只SD 应减弱，步态不稳，毛发散乱，小便色黄，大便偏稀， 大鼠分为两组，AHF组30只，健康对照组15只。 少数有鼻出血现象，处死前病死率为30％(9／30)。 350 h AHF组大鼠以TAAmg／kg腹腔注射，24 二、大鼠血清ALT、AST、TBil水平变化 后相同剂量重复一次，建立AHF动物模型。