基因芯片对外阴尖锐湿疣HPV亚型检测.pdfVIP

浙江蜜崩医学2007年12月第12卷第6期 393 基因芯片对外阴尖锐湿疣HPV亚型的检测 钱福初何建方秦基取章彤华昊原 戴利成 (湖州市中心趿院，浙江湖州313000) 摘要 网的探讨熬因芯片技术对人乳头瘸病毒(HPV)检测的实用价值和外阴尖锐湿疣(CA)患者寓颈 HPV亚型感染妖提。方法采震基因芯片方法检{爨|刀铡CA患者宫颈脱落缨藏孛HPV感染亚型(包糕5静羝危型 和18种高危型)，并与免疲组织化学检测结果进行阳性检出率的比较。结祭基因芯片检出HPV阳性64例(阳性 感染13铡(占20．3％)。结论基因芯片是一种敏感性高，特第性好，适合临床帮v分黧检测的方法。对外鞠CA 患者在治疗疣体同时进行HPV亚型检测，利于进行相应治疗，以降低宫颈癌的发病风险。 关键词 尖锐湿疣乳头瘤病毒基医芯片 寓颈癌 司产品。 Acuminatum，CA)是由人乳 尖锐湿疣(Condyloma 头瘤病毒(Human 1．3方法 Papillomavims，琢)v)感染引起一种 1．3．I标本采集及保存方法戮窥阴器或阴道张 常见的性传播疾瘸，其感染主要与HPV6、11、16、18、 31、32、35、42、43、44、54、55、74等亚型有关。近年来开器暴露宫颈，擦去过多分泌物，以宫颈刷置于宫 CA发癍率逐年增高，大多HPV感染是溉临床的且颈嬲，旋转获得足够的上皮细胞样本，然后将宫颈 具有潜在的恶性变能力，高危型感染与宫颈瘤变和 刷头部敖入洗脱管中，旋紧洗脱管盖，做好样品标 宫颈癌密切关联。基因芯片技术是90年代后发展 识，一20℃保存待测。CA患者在阴道镜指导下取 起来的毅技术，可在一个载体上同时对多个基因进 宫颈活检组织，经10％甲醛固定、脱水、石蜡包埋， 行检测，比传统兔疫学检测方法有高通量、低成本 切成4tun_|孚切片。 1．3．2基因芯片检测 的特点。为了解外阴CA患者宫颈HPV亚型感染 (1)聚合酶链反应(Poly。 状况，为临床诊治秘宫颈癌防治提供实验依据，本 meFa$eChain 研究应用基因芯片检测技术对本院就诊的77例外 阴CA患者宫颈脱落细胞进行HPV基因型检测，现心10分钟，弃上清，保留管底的细胞块。加入5叽L 报告如下。 离心lO分钟，保留上清液待用。取PCR反廒管加 1对象与方法 入已提取的待测样品DNA 5越，反应总体系为259l。 l。1怼象77例外阴CA患者为2006年1月至按以下条俘扩增：50℃，15分钟；95℃，10分镩；然后 2007年1月本院皮肤科和妇科就诊的女性患者。 年龄2l。55岁，平均32．3岁，所有患者均有CA的 典型噙床表瑰，醋酸白实验阳性，外阴CA病灶经病 心管，加A液5ml及PCR产物，混匀后憋离心管放 理检查确诊。 1．2试剂和仪器人乳头瘤病毒分型基因芯片阅 HPVl000程人乳头瘤瘸毒分型基阂 读仪Decipheflu 检测试荆盒及相关试剂均由亚能生物技术(深圳) 温轻摇浸泡30分钟，用A液室温轻摇洗两次，再用 有限公词提供；按说明书配制A液、B液、C液。分 c液室温洗膜2分钟。将膜条浸泡于显色液中避光 0，5小时左右器#可观察结果；(5)结果判断倒去显 子杂交炉(Hybaidshake’n’stack)赡窦美国The黼o