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基因工程及其应用主讲:黄冈中学生物高级教师 童金元
一、基因工程的原理
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性状。
原理:基因重组。
操作水平:DNA分子水平。
操作环境:生物体外。
结果:定向地改造生物的性状,获得人类所需要的产品(品种)。
1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶(限制酶)
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。
例如:大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
2、基因的针线——DNA连接酶
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,这样一个重组的DNA分子才能形成。
3、基因的运输工具——运载体
要让一个从甲生物细胞内取出来的基因(如抗虫基因),送入受体细胞(如棉细胞),还需要有运输工具,这就是运载体。
常用的运载体:质粒、噬菌体和动植物病毒。
大肠杆菌的质粒:
最常用的质粒是大肠杆菌的质粒,其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用,但复制只能在宿主细胞内进行。
4、基因工程基本步骤
(1)获取目的基因
基因工程的第一步,是取得人们所需要的特定基因,也就是目的基因如抗虫基因,抗病基因、种子的贮存蛋白基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等都是目的基因。
(2)目的基因与运载体结合
用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。
(3)将目的基因导入受体细胞
(4)目的基因的表达和检测
处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。
将每个受体细胞单独培养,检测是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的,保留有表达产物的进一步培养、研究。
二、基因工程的应用
1、基因工程与作物育种
1993年,中国农业科学院的科学家成功地培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉,抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白质晶体,能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物,使作物自身具有抵御虫害的能力。
2、基因工程与药物研制
许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。
微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。
胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。
将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素,使其价格降低了30%-50%!
三、转基因生物和转基因食品的安全性
当人类拥有了只有大自然才拥有的改造生物、创造生物的能力时,也感到了不安与困惑。人类是否有权按照自已的意愿操纵地球上的生命?人类创造的转基因生物、转基因食品是否会危害整个生物圈,包括人类自身?
讨论:转基因食品安全吗?
课堂训练
例1、要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是( )
①限制酶 ②连接酶 ③解旋酶 ④还原酶
A.①② B.③④ C.①④ D.②③
答案:A
例2、采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是( )
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中
②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中
③将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,并进行组织培养
④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵中
A.①② B.②③ C.③④ D.④①
答案:C
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同步测试
一、单项选择题
1、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 HYPERLINK /_padcourse2/web/SW/RE_B2_SW_22_01/RE_B2_SW_22_01_017/zxcs.htm \l #
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