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原核生物与真核生物转录起始调控的差异 09级临床一班 李舒 200910101114 注意：在生物界，RNA合成有两种方式： 原核生物的转录起始需要RNA聚合酶全酶 全酶中的?亚基识别－35区，并与之松弛结合，形成闭合转录复合体，随后打开DNA双链，形成开放转录复合体。 全酶在链上移动至－10区，并跨入转录起始点。 在RNA聚合酶作用下，两个可与模板配对的游离的核苷酸被连接起来，形成RNA。第一个核苷酸常为GTP或ATP,其中GTP更常见。 继而?亚基脱落，核心酶继续工作，进入延长阶段。 真核生物的转录起始起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与 （1）真核生物的启动子 多部位结构：包括TATA盒，CAAT盒，GC盒，增强子等。但并非都同时存在。 增强子是能够结合特异基因调节蛋白， 促进邻近或远隔特定基因表达的DNA序列。 许多RNA聚合酶II识别的启动子具有保守的共有序列：位于转录起始点附近的起始子(intiator，Inr) 。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ Ⅱ型基因中的四类转录因子 （三） 转录起始前复合物 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子，形成转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 原核基因表达调节 一、原核基因转录调节特点 原核基因转录调节的主要环节在转录起始 二、操纵子调控模式在原核基因转录起始的调节中具有普遍性 （一）乳糖操纵子 (lac operon) 的结构 （二）乳糖操纵子受阻遏蛋白和CAP的双重调节 1、阻遏蛋白的负性调节 真核基因表达调节 （一）真核基因组结构庞大 小结 真核生物的转录比原核生物更复杂 真核生物和原核生物的RNA聚合酶种类不同 真核生物与原核生物结合模板的特性不一样 * * ?DNA指导的RNA合成，也叫转录，此为生物体内的主要合成方式 另一种是RNA指导的RNA合成，也叫RNA复制。由RNA依赖的RNA聚合酶催化，常见于病毒，是逆转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA的方式。 （2）转录因子(transcriptional factor, TF) 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。对应于RNA－polI , II, III, 可将TF分别称为TFI, TFII, TFIII. RNA聚合酶II与启动子的结合、启动转录需要多种蛋白质因子的协同作用。因子和因子之间互相辨认、结合，以准确地控制基因是否转录、何时转录。 时间和空间（组织）特异性地调控转录 增强子等远隔调控序列 如MyoD、HIF-1等 可诱导因子 协助基本转录因子，提高转录效率和专一性 启动子上游元件 SP1、ATF、CTF等 上游因子 在可诱导因子和上游因子与基本转录因子、RNA聚合酶结合中起联结和中介作用 TAFs和中介子 辅激活因子 转录起始定位； 转录起始和延长 TBP结合TATA盒 TBP,TFⅡA,B,E,G,F和H 基本组分 功能 结合序列 具体组分 转录因子 （一）σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 （二）操纵子模型的普遍性 （三）原核操纵子受到阻遏蛋白的负性调节 调控区 CAP结合位点 启动序列 操纵序列 Z Y A O P DNA 结构基因 Z： β-半乳糖苷酶 Y： 透酶 A：乙酰基转移酶 2、CAP的正性调节 无葡萄糖，cAMP浓度高时，cAMP与CAP结合，CAP结合在lac启动序列附近的CAP位点，可刺激RNA转录活性。 有葡萄糖，cAMP浓度低时，cAMP与CAP结合受阻，lac操纵子表达下降。 3、协调调节 当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用。 如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression)。 哺乳类动物基因组DNA 约 3×109 碱基对。 人编码基因约4万个，编码序列仅占总长的1%。 rDNA等重复基因约占5%~10%。 （二）真核基因转录产物为单顺反子 单顺反子(monocistron) 即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 （三）真核基因组