A型产气荚膜梭菌α毒素基因表达与其免疫保护作用的初步研究.pdfVIP

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 !（）： ! #! #% 年 月 日 #$$ % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! ’()(*+ #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ! 型产气荚膜梭菌 毒素基因表达及其 ! 免疫保护作用的初步研究 1 # # 许崇波 ，许崇利 ，赵志军 1 （大连大学生物工程学院 大连 11## ） # （宁夏大学生命科学学院 银川 2A$$#1） 摘 要：利用 技术，从 型产气荚膜梭菌标准株染色体 中扩增出 毒素基因，构建了含 毒素基因的重组 BCD ’ EF’ ! ! 菌株 （ ）（ ）。经酶切鉴定和序列测定证实，构建的表达质粒 含有 毒素基因序列。经 GH#1 E6, IJ6-’$# IJ6-’$# ! 、 分析和 检测，重组菌株表达的 毒素蛋白能够被 毒素单抗识别。表达优化结果表 KEK0B’L6 M.*+.NO :/=+ 6HPK’ ! ! 明，以 为诱导剂诱导 毒素表达的优化条件是：培养基 ，培养温度 ， 浓度 ，菌体生长 PB-L ! IQ 2 RA ,2 S PB-L $ R%77=/T H 密度 达到 时加入 ，诱导时间 ，此时 毒素蛋白表达量为 。以乳糖为诱导剂诱导 毒素表达 !$$ $ R% PB-L A ! ,! R%,U ! 的优化条件是：培养基 、培养温度 ，乳糖浓度 ，菌体生长密度 达到 时加入乳糖，诱导时间 IQ2 RA ,2 S $ R 1)T H !$$ $ R% ，毒素蛋白表达量为 。动物实验结果表明，用重组菌株 毒素蛋白免疫的小鼠可以抵抗 的 型产 A ! #, R%# U ! 1VHE ’ 气荚膜梭菌标准株CA201 毒素攻击。 关键词： 型产气荚膜梭菌；毒素；基因表达；免疫保护作用 ’ ! 中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ） K%A# W2%