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系列实验Ⅰ 液体通气发酵——谷氨酸发酵 实验目的 谷氨酸(Glutamic acid)是最先成功地利用发酵法进行生产的氨基酸,谷氨酸发酵是典型的代谢调控发酵,因此,了解谷氨酸发酵机理,掌握其发酵工艺,将有助于对代谢调控发酵的理解,有助于对其它有氧发酵,特别是氨基酸发酵的理解和掌握。 谷氨酸发酵生理 谷氨酸发酵包括了谷氨酸的生物合成和产物的结累二个过程 EMP和HMP TCA循环 DCA循环 CO2的固定 氨的导入 实验室谷氨酸发酵 一、谷氨酸菌种的制备 一、谷氨酸菌种的制备 二、发酵罐构造的熟悉及空气管路的灭菌 1. 方法:蒸汽灭菌法,事先打开蒸汽发生器 蒸汽发生器使用注意:使用时保持进水; 一般保持“自动”位置 2. 调节压力0.11Mpa,并保压30分钟,在此过程中,时刻注意观察此压力。 3. 空气过滤器的吹干: 事先打开空气压缩机; 空气管道灭菌时间到后,关上排污阀,打开空气阀,送入空气吹干过滤器,约需20~25分钟。? 三、发酵罐的空消 四、发酵培养基的配制 按工艺要求配制培养基(课本P88)和40%的尿素。 培养基体积: 理论容积:按发酵罐容积的70%来定容; 实际定容:按照预定体积的75%来定容,余下的25%留 给蒸汽冷凝水和种子液。 放入pH、OD电极(注意事先要校对) 空消后待罐温度降低,手摸玻璃视窗不烫手,才可倒入培养基。否则冷热刺激,玻璃会破裂。 五、实消 (1)先打开进夹套的蒸汽阀和夹套下排水,开启搅动,待温度上升到90度时,关闭夹套进汽阀,打开进发酵罐的蒸汽阀,继续升温到实验要求。 (2)保压0.11MPa,105℃保持5分钟。 (3)时间到后,关闭进气阀,打开冷却水进行冷却;注意保持罐压0.03~0.05MPa (4)温度降至40度左右时,加初尿,添加量为0.6~1% 六、接种 七、发酵过程的控制 (1)长菌期:0 ~12小时,最适温度30~32度,控制pH不大于8.2。 (2)产酸期:12小时后,控制温度34~36度,控制pH在7.1~7.2。 八、放罐 系列实验Ⅱ液体静止发酵——啤酒发酵 实验目的 通过啤酒的实验室发酵试验,熟悉无氧发酵工艺的大致过程,了解啤酒的酿造特点,从而增强对啤酒发酵的感性认识,为有志于啤酒生产与科研的同学打下基础。 啤酒发酵概述 啤酒是一种以麦芽汁为原料,经酵母菌发酵酿制而成的含酒精饮料。 啤酒发酵生理学 啤酒的化学组成 啤酒发酵过程 一 、 啤酒的化学组成 啤酒中所含的成分很多,除水外,还有其它近600种成分,其中主要有: 1、酒精 2、浸出物 3、二氧化碳 4、挥发性成分 二 、啤酒发酵过程 酵母菌是一种兼性厌氧微生物,有氧时进行呼吸作用,糖的消耗缓慢,酒精的产量很低,这种呼吸抑制发酵的现象,称为巴斯德效应(Pasteur effect)。但在有氧条件下,如果含糖含量过多(葡萄糖浓度超过4g/L时)又会使呼吸受抑,从而促使发酵的进行,这种现象称为克拉勃脱效应(Crabtree effect),又称反巴斯德效应。 啤酒发酵过程中,酵母主要通过EMP途径进行酒精发酵,生成大量乙醇,CO2和微量乳酸,但也有少量糖(约占4~6%)通过HMP途径,合成NADPH 以及戊糖原料。 三、啤酒发酵的原料 啤酒发酵的主要原料是麦芽汁,是由麦芽经粉碎后兑水糖化而成。为了降低成本,大多数厂家都会适当添加一些辅助原料。另外,为了保证啤酒的品质和口味,麦汁中必须添加一定浓度的酒花。 1. 水 2 . 麦芽:大麦经浸麦、发芽、烘干、焙焦而成 3 . 辅料:采用富含淀粉的谷类、糖类或糖浆作为辅助原 料 4 . 酒花:利用其苦味、香味、防腐力和澄清麦汁的能力 四、麦汁的制备 主要过程: (1)麦芽和谷物的粉碎; (2)糖化制成麦芽汁; (3)过滤分离麦糟; (4)麦汁煮沸并添加酒花; (5)麦汁预冷却和冷却。 1. 麦芽粉碎 目的:使表皮破裂,增加麦芽本身的表面积,使其内容物质更容易溶解,利于糖化。 要求:表皮的破碎要破而不碎。因为表皮的主要组成是各种纤维组织,其中有很多物质会影响啤酒的口味,如果将其粉碎,在糖化过程中,会使其更容易溶解,从而影响啤酒的口味;其次在糖化后的过滤中,可以让其充当过滤层,达到更好的过滤效果。 2. 糖化制成麦汁 糖化:利用麦芽所含的各种水解酶,在适宜的条件下,将麦芽中不溶性高分子物
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