紫外-可见分光度法UV.ppt

控制吸光度测量范围 吸光度控制在0.2-0.7。 方法：调节溶液的浓度 改变吸收池的厚度 §4 紫外-可见分光光度计 单色光 I0 I 单色器 复合光 狭缝 I0 比色池 检测器 记录 ? 在紫外-可见光区可任意选择不同波长的光测定吸光度的仪器 （一）光源 要求：发射强度高、稳定、具有连续光谱 ●钨灯和钨卤灯：波长覆盖宽，但紫外区很弱。常取波长大于350nm的光为可见区光源 ●氢灯和氘灯：发出波长为150-400nm的连续光谱。 一、主要部件 （二）单色器 从光源的连续光谱中分出单色光 组成：进口狭缝、准直镜、色散元件、出口狭缝 单色器光路示意图 1）色散元件：棱镜和光栅 棱镜:利用其对不同波长的光有不同的折射率。 缺点：色散后光谱按波长排列疏密不均，长波区密，短波区疏。为非均匀分布光谱。 分光系统 红 紫 光栅:利用光的干涉作用。 特点：色散后的光谱，各谱线间距离相等，为均匀分布的连续光谱。 2）准直镜：以狭缝为焦点的聚光镜。将发散光变为平行光，将色散后的平行光聚焦。 3）狭缝：狭缝宽度直接影响分光质量。过宽，单色光不纯，太窄，光通量小，降低灵敏度。 （三）吸收池（比色池、比色皿） ●玻璃比色皿，只能用于可见光区。 ●石英比色皿，可用于紫外光区和可见光区。 ●型号有：0.5、1.0、2.0、5.0cm （四）检测器 将光能转变成电能的装置。 光电池：是一种光敏半导体。 要求：灵敏度高，噪声低 分类：硒光电池和硅光电池。 特点：光电流大小与照射光强成正比。 光电流不易放大，光强弱时，不能测量。 易“疲劳”，不能长时间使用。 A 光电管 光 阳极 光敏阴极 放大器 指示器 特点：电流可放大，较有高灵敏度。 有“疲劳现象” 光电倍增管 光电倍增管大大提高了仪器测量的灵敏度。 光二极管阵列检测器：由一系列的二极管紧密排列在一块硅晶体片上组成。 光 例：HP8452A型二极管阵列：波长范围为190-820nm，二极管316个。 λ A 特点：测量速度快 （五）信号显示系统（记录系统） 分类：指针显示 数字显示 2.跨环效应 3.溶剂效应：除了影响吸收峰（λ）位置外，还影响吸收强度（ε）和光谱形状。 溶剂极性对异丙叉丙酮的两种跃迁吸收峰的影响 跃迁类型 正已烷 氯仿 甲醇 水 迁移 π -π * 230 238 237 243 长移 n -π * 329 315 309 305 短移 4.体系pH值的影响：主要是对弱酸弱碱性物质的影响。 非极性溶剂 极性溶剂 非极性溶剂 极性溶剂 n→π*跃迁 π→π*跃迁 §2 Lambert-Beer定律 一.参数 1.入射光的强度I0 I0 b 2.透射光的强度It It 3.透光率 T＝It/I0 百分透光率T％＝I/I0× 100％ 4.比色池厚度：b 5.样品浓度：C（mol/l，％） 6.吸光度：A＝－lgT=lg(I0/It) 二.Lambert-Beer定律 Lambert定律：C一定，A＝-lgT=K1b Beer定律：b一定，A＝-lgT=K2c 两定律合并：A＝a·b·c a=K1K2 a为吸收系数 注：吸光度A是指某一波长（λ）下的吸光强度即入射光为单色光 吸收系数： 摩尔吸收系数(ε)：在一定条件下，当C＝1mol/l，b=1cm时的吸光度。 百分吸收系数（ ）：一定条件下，当C＝1％，b=1cm时的吸光度。 特征： 1）ε、E均为特征常数 2）ε、E是有条件的，同一物质，不同条件下所测值不同（波长不同、溶剂不同、温度不同等）。 3）ε、E越大，测定吸光度灵敏度越高。 4）ε=104-105为强吸收，103-104为中吸收，103为弱吸收。 例：紫草素（C16H6O5 288.3），2.00mg溶于100.0ml乙醇中，b=1cm，λmax =516nm，A=0.484.求ε、E 注：若溶液中存在多种吸光物质时，吸光度将是各组分吸光度的总和。 A总＝Aa+Ab+Ac+…… ＝ εadCa+ εbdCb+ εcdCc+…… I0 a、b、c I d 注：每种物质的吸收度仅由本身的性质和C决定，与其它物质无关。 吸光度A具有加和性，对同一物质来说 4A 4C 3A 3C 2A 2C A 1C 0 0 吸光度（A） 浓度（C） 线性范围：线性范围越大越好。 工作曲线 C A 负偏离 正偏离 C1 三、偏离Beer定律的因素 1)化学因素：离解、缔合、配位等化学 变化，使吸光物质形态发生变化。溶剂、pH、温度等影