边界病病毒E2蛋白质的原核表达及间接ELISA检测方法的建立.pdfVIP

江苏农业学报 (Jiangsu ofAgr．Sci．)，2015，31(1)：93—99 http：／／www．jsnyxb．com 毛 立，刘 霞，李文良，等．边界病病毒 E2蛋白质的原核表达及间接 ELISA检测方法的建立[J]．江苏农业学报，2015，31 (1)：93—99． doi：10．3969／j．issn．1000-4,,!．／0．2015．01．014 边界病病毒 E2蛋白质的原核表达及 间接 ELISA检测 方法的建立 毛 立 ， 刘 霞 ，一， 李文良 ， 杨蕾蕾 ， 张纹纹 ，魏建忠 ， 江杰元 (1．江苏省农业科学院兽医研究所／农业部兽用生物制品工程技术重点实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014；2．安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036) 摘要：边界病病毒(Borderdiseasevirus，BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原。为了建立检测 BDV 特异抗体的ELISA方法，本研究将BDV基因克隆入原核表达载体 pET-32a(+)，并构建重组表达菌 ，经 SDS 和Westernblot鉴定 目的蛋白质。以纯化的重组表达蛋白质为抗原，建立间接ELISA(rE2一ELISA)检测方法。通过 反应条件优化，确定抗原包被浓度4．0