蚯蚓纤溶酶的纯化及pH值、温度和胰蛋白酶对其纤溶活性的影响.pdfVIP

维普资讯 中国生化药物杂志 ChineseJournalofBiochemicalPharmaceutics2003年第 24卷第 4期 167 蚯蚓纤溶酶 的纯化及 pH值 、温度和胰蛋 白酶对其纤溶活性 的影响 刘 美艳 ，张双全。，张 健 (1．徐州师范大学 生物系，江苏 徐州 221116；2．南京师范大学 生命科学学院，江苏 南京 210097) 摘 要 ：目的 纯化并鉴定蚯蚓纤溶酶 ，研 究 pH、温度和胰 蛋 白酶对其纤溶活性 的影响 。方法 以赤子爱胜蚓 为材料 。采用硫酸铵盐析、DEAESet．haroseCL-6B离子交换色谱 、SephadexG-75凝胶过滤和制备 电泳等分离技术纯化 蚯蚓纤溶 酶 ；利 用纤维平板和 聚丙烯酰胺凝胶 电泳研 究pH、温度和胰 蛋 白酶对蚯蚓 纤溶 酶 纤溶 活性 的影响 。结果 分离得到纤溶酶4种单一组分 ：EFE．1、EFE．2、EFE．3、EFE．4；分子量分别为 27000、28000、23000、33000；4种组分对 温度的适应范围较广 ；pH值对其纤溶活性的影响不尽相 同，但都在 pH低于 1．5时纤溶活性完全丧失 ；胰 蛋 白酶对 纤溶酶 4种组分均无降解作用 ，对其纤溶活性无影响。结论 纤溶酶 口服药制剂宜制成肠溶型 。 关键词 ：赤子爱胜蚓 ；纤溶酶 ；分 离纯化 ；稳定性 ；胰 蛋 白酶 中图分类号 ：Q556；11282．74；R972 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005．1678(2加3)04．0167-40 Purification andeffectofpH value，temperatureand trypsinon theactivitiesof fibrinolyticenzymesfrom earthworm Eiseniafoelide LIUMei．yan一，ZHANG Shuang．quan ，ZHANGJian (1．DepartmentofBiology，XuzlwuNormalUniversity，Xuzhou221116，China；2．DepartmentofBoiolyg ， № ngNorrrrrrrr rmalUniversity，Nanjing210097，China) ．．．．．．．．． Abstract：eurpose Topurify，identifyfibrinol~icenzymesfrom Earthworm andtostudyoneffectsofpH value，temperaturenadtrypsinontheactivitiesofEFE．MethodsTheprocedure ofpurificationincludedaln- monium sulphateprecipitation，ion-exchnagechromatographyOnDEAE-SepharoseCL-6B，SephadexG-75gel fihrationnadpreparativePAGEelcetropheresis．EffectsofpH value，tempe rature na dtrypsinonhteactivities offourcomponentsofEFEwerestudiedwiht fibrinousplatena dPAGE．ResultsFourcomponentsoffibrinol~- icenzyme(EFE