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西罗莫司纳米制剂的吸收和代谢研究 药学院 3041909057 柴晓鹃 药学0401 导师 曾苏 教授 药学院 摘要 纳米微粒的小尺寸效应、表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应使其 与宏观材料相比具有特殊的理化性质、生物活性和生物动力学过程。纳米载体可 能会改变药物的理化性质，从而引起药物稳定性、溶解性及药代动力学的改变。 这些改变可能会影响药效的发挥以及药物的安全性。 目前纳米药物的研究还处于起步阶段，研究工作主要集中在新的纳米药物和 纳米载体的开发。而有关纳米制剂的吸收、分布、代谢、排泄及毒理学研究很少 有报道。本研究旨在通过比较西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒的体外吸收和 代谢情况，为纳米药物体内过程和毒性的进一步研究提供相关信息。 一、西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒在鼠肝微粒体中的代谢 目的研究西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒在鼠肝微粒体中的代谢情况，比 较两者是否存在差异。 方法 建立鼠肝微粒体中西罗莫司的反相高效液相色谱 （RP-HPLC ）测定法，并对西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒在鼠肝微粒体 中的代谢进行研究。将药物与鼠肝微粒体进行体外共孵育60 min，RP-HPLC 法 测定孵育后剩余的西罗莫司的量。结果 西罗莫司在0.50～100.00 μg/mL 浓度范 围内呈良好的线性关系，采用加权最小二乘法处理得标准曲线方程Y ＝56.30X－ 2.11 ，r =0.9999 。测得检测限（LOD ）为0.1 μg/mL （S/N＝3 ），定量限（LOQ ） 为0.5 μg/mL （RSD ＝1.7%，n=5 ）。高、中、低三种不同浓度的方法回收率分别 为(100.3±0.5)%、(98.8±0.9)%、(101.0±1.7)% (n=5) ；日内精密度﹤2.0% (n=5) ； 日间精密度﹤9.0% (n=5) 。在鼠肝微粒体中孵育60 min 后，原料药组和纳米制剂 组中西罗莫司的量分别减少了 44.3% ，43.1% ，而对照组减少了 41.9% ，西罗莫 司的净减少量分别为 2.4% ，1.2%。 结论 鼠肝微粒体孵育后，西罗莫司固体脂 质纳米粒的减少量比原料药少，但西罗莫司在孵育体系中很不稳定。因此，实验 结果可能有较大的误差，两者代谢是否有差别还有待进一步研究。 二、西罗莫司及其固体脂质纳米粒在MDCK/MDCK-MDR1 细胞模型中的转运 目的研究西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒在 MDCK/MDCK-MDR1 细胞模 型中的转运情况，比较两者是否存在差异。方法 建立转运液中西罗莫司的反相 高效液相色谱（RP-HPLC ）测定法，并对西罗莫司原料药及其固体脂质纳米粒 在MDCK/MDCK-MDR1 细胞模型中的转运进行研究。分别于0.5 h、1 h、1.5 h、 2 h 、2.5 h 、3 h 取样测定从肠腔侧到基底侧转运（AP→BL ）和从基底侧到肠腔 侧的转运（BL→AP ）的药物量。 结果 西罗莫司在5.00～100.00 μg/mL 浓度范 围内呈良好的线性关系，标准曲线方程为Y ＝51.55X－207.11 ，r = 0.9997 。测得 检测限（LOD ）为1.00 μg/mL （S/N＝3 ），定量限（LOQ ）为5.00 μg/mL （RSD ＝5.2% ，n=5 ）。高、中、低三种不同浓度的方法回收率分别为(96.7±3.1) ％、 (95.0±3.0)%、(107.4±1.4)% (n=5) ；日内精密度﹤5.5% (n=5)；日间精密度﹤7.5% (n=5) 。阳性对照的净外排率为2.07 ，符合要求。但是，西罗莫司原料药透过MDCK 及MDCK-MDR1 细胞量较少，部分时间点的样品浓度低于定量限，用HPLC-UV 不能准确定量。而西罗莫司固体脂质纳米粒组各时间点几乎不能测到西罗莫司的 峰。 结论 由于西罗莫司在HBSS 中水溶性、稳定性较差，定量限较高，使本实 验无法准确测算西罗莫司的Papp 值和净外排率。有关西罗莫司原料药及其固体 脂质纳米粒的吸收情况有待进一步研究。 关键词：西罗莫司；固体脂质纳米粒；吸收转运；代谢 Study on the Absorption and Metabolism of Sirolimus Nanoparticles Co