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* * * 免疫学诊断、沉淀反应 实验室安全-门窗、水、电、火源 实验结束后关闭门窗、水、电、火源 酒精灯和易燃物的使用注意事项;棉塞着火须报告老师 电源-空气开关 水的使用 实验室安全-生物安全 白大褂的穿着要求 不得将实验无关物品带入实验室 不得在实验室内饮食 不得擅自开UV灯 污染及潜在污染物品须进行消毒处理 实验室规则-要点 实验课要求 遵守上述规则 必备物品:实验指导、实验报告、红蓝铅笔、白大褂 注意保护自己、爱惜实验室仪器和设施 按照实验要求,认真完成实验并如实记录实验报告 实验结束后整理本组的台面 实验废弃物分类(污染/潜在污染物、普通废弃物)放置; 在确认普通废弃物没有着火隐患后,倒入垃圾桶 实验室规则-要点 值日生的职责: 检查实验台面的整理 整理实验室及垃圾 关闭所有非必需的电器和电源 逐一检查并确认水槽水龙头的关闭 关闭窗、门 最后离开实验室 实验室规则-要点 1. 录像 2. 双向免疫扩散试验(操作) 3. 对流免疫电泳(示教) 本次实验内容 类型: ★单向免疫扩散 ★免疫比浊法 ★双向免疫扩散 ★对流免疫电泳 沉淀反应: 可溶性抗原(血清蛋白质、细胞裂解液、组织浸液、微生物蛋白等)与相应抗体,在一定的抗原抗体比例下,在一定离子浓度的缓冲体系中,发生结合后出现沉淀物称沉淀反应。 沉淀原,沉淀素。 环状法、絮状法、琼脂扩散法 2. 可见性 3. 可逆性 1. 特异性 抗原抗体反应的特点(比例合适!) (三) 影响抗原抗体反应的因素 1.温度: 一般最适温度为37℃ 4℃,过夜 2.电解质:常用生理盐水 离子强度,盐析 3.pH:一般最适pH6-8 电荷,等电点 (1)单向免疫扩散 抗原的定量技术 Method: Ab- in gel Ag- in well 该方法常用于患者血样中IgG、IgM以及C3含量的检测 Q: 如使用单向免疫扩散试验检测患者血样中的IgG,那么患者血样是放在琼脂糖胶中,还是放入孔中? (2)双向免疫扩散 抗原或抗体的定性、组成和两种抗原的相关性分析。 抗原抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,二者自由向四周扩散;两者相遇时在比例合适处形成沉淀线。 抗原 抗体 双向琼脂扩散试验 * *
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