cDNA-AFLP结合BSA的研究马铃薯晚疫病菌小种特异无毒基因差异表达片段.pdfVIP

cDNA。AFLP结合tKqA研究马铃薯晚疫病菌小种特异无毒基因差异表达片段——郭军，屈冬玉，王晓斌等 ‘1。 一————————————————————————————————————————————————————————————————一 ■翟圆墨 cDNA—AFLP结合BSA研究马铃薯晚疫病菌小种 特异无毒基因差异表达片段 Jian孑，Francine(…：-OV一一2 郭军m，屈冬玉卜，王晓武1，金黎平1，谢开云1，Rays (1．中园农科院蔬菜花卉研究所，北京100081’ andGraduateSchoolof of University Experimental 2．t．alx)ratoryPhytopathology，Wageningen PlantSciences，Binnenhavcn9，6709PD Netherlands) Wageningen，The 摘要：通过对具有6个无毒基因不同表型的马铃著晚疲病菌构建的4个混合池进行cDNA— 的为20条，Avr228条，Avr3．Avrl0一Avrll16条，Avr421条。差异表达片段大小主要分布在100bp 和300 bp之阍，最小冀段两鳓bp，最失片段440bp。差异表达片段的获得将有霹lj我们下一步克隆全 长无毒基因和时晚疫病垂直抗性机制的研究。 关键词：马铃薯晚疫病菌；小种特异无毒基因；cDNA。AFI。P；IzkSA；差异表达序列 中圈分类譬：s532 文献标识谒：A 文章编号：t672—3635《2004{01—001．03 虎致病痰霉(Phsco#h．thora cDNA-AFLP是近年来发展起来的一种重要的转录 infestans)引起的马铃 薯晚疫病是马铃薯生产中最严黧的病密，也是所有农 基因组学研究工具，被广泛用于基因差异表达的研 作物中造成撰失最严重的病害，是整赛粮食生产中的 究眇?婚』。本骚究拟通过稍鼹该技本并结合转SA 主要威肋·…。过去十多年来，全世界许多植物病理学 (BulkSegregantAnalysis)方法研究马铃薯晚疫病 家开始着手予病骤菌的磷究，特别是病菌靛致病因子 菌正在萌发静孢囊时期(germinatingcyst)鹩6个 和非致病因子，希望通过从病菌】的角度出发揭示其致 无毒基因在转录水乎上的表达，期塑初步获得与6 病机制和寄主抗性机制，以防治全世界日趋严重的马 个无毒基因相关的差异表达片段。 Gene，筒称 铃薯魄疫病。病菌的无毒基因(Avimlence 1材料与方法 AW基因)是非致病因子中研究的热点，是病原物中 决定对带有撼应抗瘸摹毽鲍毒主植物特异豹不亲积无 {，{BSA分耩 毒性基因。无毒基因已在多种植物病原物，包括真 供试菌株由荷兰瓦赫宁根大学植物病理实验窒 菌}引、细蕊‘引、病攥H3和翔菌嘲等中得蓟壳隆。萄蓠 荷兰瓦赫宁根大学植物病理实验室C瓠惯s研究小组正 表l惩来簿选与无毒基嚣有关的差异表达片 在利弼图位竞隆法鉴定马铃薯晚疫病胬无毒基因并豆 段构建的4个池 取得较大的进展∞州o。然而，目前他们面临的最大