鼻咽癌细胞系中LTF基因的表达及遗传学和表观遗传学改变.pdfVIP

虫堡胜擅塞壹!Q!!玺!!旦筮丝鲞筮!Q翅垡!边』Q!趔：Q!鲤蛭!垫!Q：!!!：!!：№：!Q ．基础研究． 鼻咽癌细胞系中LTF基因的表达及遗传学 与表观遗传学改变 易红梅李艳春钟仁华 【摘要】 目的柃测鼻咽癌(NPC)细胞系中L1F基因的表达水平，并分析遗传学和表观遗传学 改变与其表达的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)，检测NPC细胞系HNEI、HNE2、 HNE3、CNEI、CNE2、5-8F、6一lOB和15例慢性鼻咽炎组织中LTFmRNA表达水平，同时通过Western blot法分析6．10B细胞中岍蛋白水平。运用微卫星分析技术、聚合酶链式反应·单链构象多态 (PCR-SSCP)方法和甲基化特异性PCR(MSP)以及亚硫酸盐克隆测序方法，分别检测L1百的杂合性 丢失、突变和启动子区甲基化情况。结果在15例慢性鼻咽炎组织中，岍基因稳定表达。在NPC 细胞系中，除6-10B细胞有LTF基因弱表达外，其余均表达缺失，显著低于慢性鼻咽炎组织中的表达 (z=一3．738，P=0．000)，且6-10B细胞中无u下蛋白的表达。杂合性丢失分析显示，NPC细胞系中 不存在L1rF微卫星位点的缺失。突变检测显示，LTF在NPC细胞系中的突变率为14．3％(1／7)，且突 变存在于HNEl细胞系中，即启动子序列一305至一50bp发生了缺失突变(一218delT)。甲基化分析 显示，岍基因在慢性鼻咽炎组织中无甲基化，而在所有NPC细胞系中均有甲基化。用5-杂氮．2-脱 氧包苷处理5-8F和6-10B细胞后，LIFmRNA表达上调。结论L1F基因在NPC细胞系中表达失活， 其分子机制与启动子高甲基化和缺失突变有关。 【主题词】 鼻咽肿瘤； 细胞系；LTF；突变；甲基化；遗传学；表观遗传学 in celllines and alterationsofLTF carcinoma Expression．geneticepigenetic genenasopharyngeal YI Province7s Hong-mei，LIYan—chun，ZHONGRen·hua．Departmento／Pathology，HunanPeopleHospital， 41DDD5．China Changsha To the ofL11FmRNAinseveral cancer Objective 【Abstract】 investigateexpression nasopharyngeal the betweenthe and and of (NPC)celllines，andanalyzerelationship geneticepigeneticchangesexpression L1[-F The levelofL1rFW85detectedinNPCeelllines gene．Methodsexpression HNEl。HNE2，HNE3。 cellsandtissuesof15casesofchronic RT．PCR．TheIJ下 CNEl，CNE2。5-8F，6．10B nasopharyngitisby was Western in6．10B and statusof hvel cells．ThenLOH．mutation protein analyzedby blotting methylation L1rFwasexaminedmierosatellite