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卷 期 生 物 工 程 学 报
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人绒毛膜促性腺激素 亚基单一 细胞表位（ 、 或 ）
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融合蛋白的表达和纯化
徐万祥 何亚萍 何 远 王丽婷 孙志达
（上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室，上海 !0! ）
季朝能 顾少华 陈金中 应 康 谢 毅
（复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室，上海 !$00 ）
摘 要 作为开发新型实用性人绒毛膜促性腺激素（ ）疫苗的一种尝试，我们已构建若干组合靶抗原三个线性
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细胞表位和外源强 细胞表位的基因工程 嵌合肽。为了检测用这些嵌合肽免疫的动物血清中是否能产生
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抗各表位的三种抗体，本研究选用能在大肠杆菌中高表达和与生物素亲和性强且特异（方便通过亲和层析纯化）的
链霉亲和素为载体，分别构建了三种含 不同单一线性 细胞表位（ ， 和 ）的融合蛋白。在链霉亲和素
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基因下游多克隆区30( I 和4#$E 位点插入各表位编码基因片段（带7JJ 终止密码子）的@7KJ1#4 重组质粒，转
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化 （ ） 宿主菌后，它们在 诱导下均能以较高水平表达各自目的融合蛋白，而且它们的表达产物
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在P8?A8., Q’A 鉴定中都能被抗各表位特异的多抗或单抗或抗报告表位单抗识别。用改良的制备性OJG9 方法可
以一步纯化电泳均一性高于 的三个融合蛋白，它们的收得率相对 培养物约为 。作为化学合成表位肽
35 R #L 5 :S
的替代物， 三个单一 细胞表位融合蛋白的可获得性将有助于所构建 基因工程嵌合肽以及其他
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疫苗，也包括它的M)J 疫苗的免疫原性分析。
关键词 CFG 亚基，线性表位，链霉亲和素，融合表达，免疫印迹，纯化
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中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ）
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