蛋白质提纯与结构鉴定研究进展.pdfVIP

维普资讯 第 17卷 第3期 信阳农业高等专科学校学报 Vo1．17No．3 2007正 9月 Journal ofXinyangAgriculturalCollege Sep．2007 蛋白质提纯和结构鉴定研究进展 帅行明，姜 伟 (漯河职业技术学院轻工系，河南 漯河462002) 髫摘 要：综述了蛋白质的提取方法、纯化技术、结构鉴定技术及影响蛋白质分离和提取的因素，旨在为开展蛋白 质的制备及其应用研究提供理论依据。 关键词 ：蛋白质；提取；纯化；结构鉴定 中图分类号：Q51 文献标识码：A 文章编号：1008-4916(2007)03-0122-03 Researchadvancesofpurfiyingandstructureelucidationofprotein SHUAIXing-ming，JIANGWei (Dept．ofLightIndustry，LouheVocationalTechnologyCollege，Luohe462002，China) Abstract：Themethodsandconditionsofproteinpreparationraediscussed，andhtemehtodsofpickupnadstructure elucidationraediscussed，themehtodsandinfluencefactorsoffactionationandextractionofproteinswereintroduced．It maygivesomehelptostudyonhteprepraationna dapplicationofprotein． ． Keywords：protein；isolation；purification；structureelucidation 蛋白质是生物体中含量最高、功能最重要的生物 面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点 大分子。做为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生 考虑提取蛋 白质和酶时一般采用低温 (5℃以下)操 命体内各种反应，调节代谢，抵御外来物质入侵及控 作。另外，蛋白质、酶是具有特定等电点的两性电解 制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此，蛋 质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 白质也是生命科学中极为重要的研究对象。蛋白质 范围内。一般来说，碱性蛋 白质用偏酸性的提取液提 的制备工作涉及物理、化学和生物等方面知识，但基 取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。再则，稀浓度 本原理不外乎两方面。一是利用混合物中不同组分 可促进蛋 白质的溶解，称为盐溶作用。同时稀盐溶液 分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两 因盐离子与蛋白质部分结合有保护蛋白质不易变性 个或几个物相中；二是将混合物置于单一物相中，通 的优点，因此在提取液中，加入少量 NaC1等中性盐， 过物理力场的作用使不同组分分配于不同区域而达 一 般以0．15mol／，L浓度为宜。缓冲液常采用0．02— 到分离 目的。本文针对近年来有关蛋 白质提取分离 0．05M磷酸盐和碳酸盐等稀盐溶液。 纯化和结构鉴定技术所取得的进展作简要综述。 1．2 酶法 由于米糠中的蛋 白质与纤维素、糖类、植酸盐等 1 蛋白质 (包括酶)的提取 其他成分键合牢固，使得米糠蛋白较其他植物蛋白的 1．1 水溶液提取法 提取困难。米