定量PCR检测在血液肿瘤合并侵袭性真菌感染患者早期诊断中的意义.pdfVIP

书面交流 定量PCR检测在血液肿瘤合并侵袭性真菌感染 患者早期诊断中的意义 刘淑娟王欣钟宁刘新李英袁代房孝生姜玉杰封丽丽 山东大学医学院诊断学研究所 目的：在免疫功能低下患者中侵袭性真菌感染(IFI)的患病率及死亡率呈逐年上升趋 势(1)。定量PCR具有较高的敏感性和特异性，可用于监测IFI病情进展和用药调整，但目 前PCR检测缺乏国际通用标准。本研究旨在探讨定量PCR联合GM检测在恶性血液疾病患者 合并IFI诊断中的应用价值。 方法：1．采集我院血液科自2010年1月至2010年12月住院的恶性血液肿瘤并存在 IFI高危患者血清标本40份作为研究观察对象，同时收集患者的临床资料，如实验室检查、 组织病理学和影像学等。依据2008年EORTC／MSGIFI诊断标准(2)，并结合我国血液病／ 恶性肿瘤患者IFI的诊断标准与治疗原则(3)，将研究对象分为：确诊、临床诊断、拟诊IFI 及非IFI者4组。2．本研究同时以取自我院细菌室2株烟曲霉菌作为阳性对照。将提取的 烟曲霉模板DNA通过倍比稀释，测定浓度，进行定量PCR检测，获取标准曲线。3．收集 DNAMINi IFI高危患者血清采用Qiamp Kit试剂盒提取真菌DNA，测定浓度，进行定量PCR 采用Platelia 次／0．5为阳性标准。5．进一步将PCR和GM检测结果与临床资料进行相关性分析。 结果：1．定量PCR结果：敏感性为0．89，特异性为0．85，阳性预测值0．89，阴性 检测结果为： 敏感性为0．83，特异性为0．80，阳性预测值0．88，阴性预测值0．73， ROC曲线下面积为0．738，提示GM可用于IFIs患者的临床诊断。3．综合分析：联合定量 提示联合应用定量PCR或GM试验敏感性高于单独应用定量PCR或GM试验。对两种检测方法 的结果采用配对计数资料的X2检验，两者在侵袭性真菌感染的诊断中一致性较差 (Kappa=O．368)，差异无统计学意义(P0．05)。 结论： 真菌定量PCR检测可作为恶性血液病患者IFI的有效诊断方法之一：而且联合 定量PCR和GM检测，其敏感性高于单独应用其中的一种。 参考文献： of inNorthAmerica．CritRevMicrobi01．2010；36(1)：卜53． 1 PfallerMA．Diekema invasivemycoses DJ．Epidemiology 206 书面交流 a1．Reviseddefinitionsofinvasivediseasefromthe 2DePauwB，WalshTJ，DonnellyJP，et fungal EuropeanOrganization andtheNationalInstituteof forResearchandTreatmentofCancer／InvasiveInfections Group Fungal Cooperative InfectDis．2008 andInfectiousDiseases Group．Clin Allergy MycosesStudyGroup(EoFrc／Ms6)Consensus Jun：46(12)：1813—21． 3中国侵袭性真菌感染工作组．血液病／恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则(第三次修订)．中华内科杂志： 2010．49(5)：451-454．