胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的实验及研究.pdfVIP

胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化 的实验研究· 谢杏榕李云静李儒贵雷飞飞李金科姚柏春谭华炳 (湖北医药学院附属人民医院湖北十堰，442000) 摘要目的探讨胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的可行性。方法通过 密度梯度分离法分离出大鼠骨髓中单个核细胞，进行体外培养和鉴定。在(BMSCs)传代培 养7天后，把培养细胞分为诱导组和非诱导组；诱导组加入大鼠胚胎肝细胞提取液的培养体 系，非诱导组加入不含大鼠胚胎肝细胞提取液的基础培养体系。在诱导培养第0d天，lO天， 20N，30天，40天对诱导分化的细胞进行形态学观察及肝系细胞特异性标志物的鉴定。结果： ①形态学：诱导培养2周后，长梭形细胞大多数转变成圆形、卵圆形及多角形，细胞呈肝干 细胞样圆形。②免疫细胞化学检测：诱导培养第10～20d天细胞表达AFP、cKl9逐渐增强，第 30～40天逐渐减弱；诱导培养第10～40天细胞表达ALB呈上升趋势；阳性染色细胞胞浆内出 3种蛋白，为阴性染色。③糖原染色：诱导培养的细胞第lO～40天BMSCs均有糖原表达，非 诱导细胞未见糖原表达(只O．05)。结论胚胎肝细胞提取液在体外可以诱导骨髓干细胞向系 细胞分化，并分化为具有合成、代谢、分泌及储存功能的肝系细胞。 关键词终末期肝病；胚胎肝细胞提取液；骨髓干细胞；肝干细胞；肝细胞；分化 The ofBoneMarrowStemCellsInduced Study Differentiationinto Hepatocyte Lineage by ExtractinVitro EmbryonicHepatocyte XIE XING—RONG，LI Yun—jing，LiRu～gui，et ofInfectious a1．Department Disease， Renmin of Hospital，HubeiUniversityMedicine，Shiyan 442000，China To whether [Abstract]Objectiveinvestigateembryonic extractinduces hepatocyte bonemarrowstemcellstodifferentiateinto in hepatocyte vitro．Methods lineage The bonemarrowmononuclearcellwas separated bydensitygradient centrifugal method，andwasculturedandidentifiedinvitro．After7 dayssubculture，the culturedcells weredividedintoinducedandcontrol