定向进化：选择今天的生物催化剂.pdfVIP

山 东 化 工 · 90 · SHANDONGCHEMICALINDUSTRY 2011年第40卷 定向进化：选择今天的生物催化剂 盂宪雨，杨 蕾 (烟台恒邦化工有限公司，山东 烟台 264100) 摘要：定向进化可以创建突变文库，应用极其广泛，主要运用于生物催化和研究两个方面。本文涉及到新的突变和最新发现的基 因重组方法，并给出了创建更加专一的突变文库新方法的全部概要，举出了在定向进化方法上挑选的典型例子，其中包括B一内酰 胺酰基转移酶在内的一些成功的实验。 关键词：定向进化；选择突变；重组方法 中图分类号：Q814；Q55 文献标识码：E 文章编号：1008—021X(2011)o5—009O一03 DirectedEvolution：SelcetingTodaysBiocatalysts MENGXian—yu，YANGLei (YantaiHumonChemicalEngineeringCo．，Ltd．，Yantai266100，China) Abstract：Directedevolutionhasbecomeafull—growntoolinmolecularbiologynowadays．Nowadays， thistechniqueisbroadlyusedintwomajorapplications：(industria1)biocatalysisandresearch．This review dealedwithnew mutagenesisandrecombination strategiespublishedrecently．A fulloverview of new methodsforcreatingmore specialisedmutantlibrarieswasgiven．The importanceofselection in directedevolutionsrtategieswasbeingexemplifiedbysomecurrentsuccessesincludinghteB—lactam acylases． Keywords：directedevolution；selectionmutagenesis；recombinationstrateyg 酶能催化各种各样的化学反应，它们可使几天 实验室则通过改变酶的遗传密码获得较好的生物催 或几个月甚至几年时间完成的转化在几分钟甚至几 化剂 。 秒钟内完成；也能催化通过化学方法难以完成的反 I 定向进化 应，像异构化、局部水解或手性基团的引入。而所有 近十年来，定向进化迅速发展，成为蛋白质工程 这些特性通常出现在室温且几乎全是水相的条件 中寻找所需特性酶常用的选择方法，并成为生物化 下，所以工业和实验室催化越来越多的依赖于酶。 学家分子工具箱中的一部分。 生物催化剂应用的研究主要是基于在制药和农业生 在自然界中，通过突变、重组以及配体的存在来 物方面 “绿色化学”和复杂活性成分生产技术的需 完成进化。而定向进化模仿了这个过程，即产生突 要。这种 “白色生物技术”依旧面临巨大的挑战，因 变异种和发现所需突变异种反复循环的过程。进化 为新的生物催化进程必须比已被优化多年的化学步 中基本的变化大多起源于遗传因子重组。在重组过 骤更少更经济…。尽管许多复杂的化学反应能通 程中，重组的频率取决于相似的程度。为得到全部 过生物催化有效地完成，但工业条件通常不同于自