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2013高考生物复习课件 选修3第二章 细胞工程.ppt
其中的关键技术是基因工程技术,转基因牛与普通牛的最根本区别是在基因组中含有外源基因,为使外源基因的整合率达到100%,应在胚胎移植之前经生物学鉴定后,再通过胚胎移植技术培育出转基因牛。 【答案】 (1)细胞核移植技术 胚胎移植技术 (2)卵细胞体积大,有利于操作,且卵细胞能在核移植后,发育成新个体 (3)A (4)转基因牛D基因组中含有外源基因,而A、B牛基因组中不含有外源基因 (5)全能性 (6)应在胚胎移植之前对胚胎细胞做生物学鉴定 (3)无菌:如果在培养基上有细菌等微生物存在,它们比植物细胞具有更强的新陈代谢能力,比植物细胞生长繁殖得更 快,而且它们会产生毒素,使培养基上的植物细胞死亡。因此,在培养过程中要求一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 [变式训练] 某同学在进行组织培养过程中发现只分裂而不分化出芽和根,可能原因是( ) A.未见阳光 B.培养时间不到 C.培养基营养过多 D.细胞分裂素和生长素配比不对 解析:选D。愈伤组织产生根或芽,取决于生长素和细胞分裂素的浓度比值:当细胞分裂素/生长素的比值低时,诱导根的分化;两者比值处于中间水平,愈伤组织只生长不分化;两者比值高时,诱导芽的形成。 视角2 体验方法要点 辨析动物细胞培养及单克隆抗体的方法 1、动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养的原因:幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很强,更易于培养。 2、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。分散细胞时不能用胃蛋白 酶。因为胃蛋白酶作用的适宜pH约为 2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2~8.4。 多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消 化。 3、制备单克隆抗体时选用一种抗原处理的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,产生杂交瘤细胞,它会兼有两个亲本细胞的特性——在体外培养条件下能不断增殖,同时能产生出某种特异性的抗体。 4、在诱导剂的作用下进行细胞的诱导融合,形成的杂种细胞有三种:AA型、BB型、AB型,只有AB型才是我们所需要的杂种细胞,所以需要用选择性培养基进行筛选。 5、相比较植物体细胞杂交,动物细胞融合特有的诱导方式为灭活的病毒处理,其他物理化学诱导融合的手段与植物体细胞杂交过程中原生质体融合方法相同。 动物细胞培养技术是单克隆抗体制备的基础。 回答下列相关问题 (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是________。 例2 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是____________________________。 (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现______________的现象; 但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞,该种细胞的黏着性________,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量__________________________。 (3)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是______________________________________________________________。 (4)病原体注入小鼠体内后,要经过________细胞处理后形成抗原—MHC复合体,才能被免疫细胞识别。 (5)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以__________________作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂交瘤细胞具有______________________特点。 (6)单克隆抗体的特点是____________________________。 根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_____________________________。 【解析】 在动物细胞培养过程中,细胞会表现出接触抑制现象,此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现衰老甚至死亡的现象,但极少数细胞可以连续增殖, 有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。灭活的仙台病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合。杂交瘤细胞同时具有两个亲代细胞的遗传特性。可以在体外也可以在体内培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 【答案】 (1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡
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