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卷 期
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年 月
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猪链球菌 型 基因免疫功能片段的克隆、表达及动物试验
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范红结 陆承平 唐家琪
（南京农业大学 畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京 #$$1; ）
#
（南京军区南京军事医学研究所 南京 #$$$# ）
摘 要：根据猪链球菌 型（ ）国外分离株的溶菌酶释放蛋白（ ， ）
# !#$%’’’() )(*) I/@* # J-,.=D.H*:,*’*.H*D @,I*B JKL
的基因序列，设计并合成一对引物，利用LMK 技术扩增了江苏分离株的开放阅读框#19 N 9#2+@ 间;#1+@ 的基因片
段，并定向克隆至 （ ）表达载体中。重组质粒经限制性酶切鉴定和测序，转化至大肠杆菌 ，经 诱
@6:3#. O PQ# RL64
导，可表达分子量约!#ST 的蛋白。经过镍亲和层析柱层析，获得纯化的重组蛋白。以重组蛋白免疫 P.’+8 ? 小鼠，
以; +,;$ 猪链球菌强毒株攻击后小鼠的相对存活率达5# U; V 。证实所表达的JKL 片段为重要的保护性抗原。
关键词：猪链球菌 型， 基因，克隆，免疫原性
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中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
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猪链球菌（ ）可引起猪的脑膜 、表达载体 （ ）由本实验室保存。攻击
!#$% ’’’() )(*) PQ# @6:3#. O
炎，关节炎以及败血症等疾病，并可致青年猪猝 用菌株为 WW#:T，其对 P.’+8 ? 小鼠的半数致死量为
［，］ ［ ］
死 # 。该菌亦可引起人类的感染，导致脑膜炎等严 5 。
# U$ [ $ M)\
［］
重疾患3 ，是一种重要的人兽共患病的病原体。猪 #! 酶和试剂
［ ］
链球菌共分为 ! N 5 和 等限制性内切酶以及 酶、
个血清型 ，其中猪链球菌 型 !.’ 1*
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