重组DNA技术中可诱导基因表达调控系统.pdfVIP

《生命的化学》2011年31卷1期 ● 技术与方法 · 14 1 · CHEMISTRY OF LIFE 2011，31(1) 文章编号: 1000-1336(2011)0 1-0 14 1-05 重组DNA技术中可诱导的基因表达调控系统 1 1 2 杨 蕾 王 澎 郑少鹏 1首都医科大学基础医学院，北京 100069; 2首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系，北京 100069 摘要：在重组D N A技术中，可诱导的基因表达调控系统可被用来调节目的基因的表达以达到基因功能研究、转基 因动物研究、以及基因治疗研究等目的。该系统主要由诱导剂、可诱导的受体或转录因子、顺式作用元件以及载 体系统四部分组成。本文以诱导剂为分类依据，叙述目前主要的 6类可诱导的基因表达调控系统：类固醇激素受 体诱导的基因表达调控系统、四环素诱导的基因表达调控系统、缺氧诱导的基因表达调控系统、高热诱导的基因 表达调控系统、电离辐射诱导的基因表达调控系统和lac基因表达调控系统。 关键词：可诱导基因表达；类固醇激素；四环素；电离辐射；lac 中图分类号：Q78 在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表 件结合、转录活化功能适中；不引起免疫反应；(3) 达形成了形态结构和生理功能不同的细胞，完成了 顺式作用元件：包括可诱导的天然或人工合成的增 细胞分化和生物体的个体发育。基因的激活或抑制， 强子-启动子(enhancer-promoter, EP)，不引发机体的 以及基因表达量的多少影响着细胞的功能和人体的 其他多种效应；针对不同疾病的治疗，可具有细胞 健康。因此，基于重组DNA技术的精确调控靶基因 类型特异性；对信号或诱导剂反应灵敏、效率高； 准确、持续并且适时、适量地表达是基因功能研究、 无诱导剂存在时无背景表达；(4)载体系统：允许外 转基因动物、基因治疗等研究中的重要领域。本文 源基因插入的容量大；纯度、滴度合适；转导效率 主要就目前及未来有希望用于基因治疗研究等方面 高；整合入靶细胞的基因组，保证靶基因的长时间 的6类可诱导的基因表达调控系统作一综述。 表达；具有细胞、组织、器官或解剖位置特异性，可 理想的用于基因治疗研究等领域的可诱导的基 感染不同的细胞、将靶基因运送到指定位置；稳定、 因表达调控系统主要由四部分组成，并具有以下一 [1,2] 无毒且不引起载体介导的机体免疫反应 。 些特征：(1)诱因或外源性药物(exogenous drug)，又 1.类固醇激素受体诱导的基因表达调控系统 称诱导剂：应安全、无毒，诱导剂量低于细胞毒水 该系统目前主要有两类经过修饰的孕酮受体： 平；能够渗透到靶器官或靶组织内；有适当长度的 (1)具有孕酮受体C末端截短结构的受体。(2)人类孕 半寿期，不过长或过短，以便快速、有效地开启或 酮受体的配体结合域hPRB891、酵母菌Gal4 DNA结 关闭靶基因的表达；不引起机体的免疫反应；(2)可 合域和HSV-1的VP16蛋白活化域融合受体。上述受 诱导的受体或转录因子(transcription factor, TF)，又 体可排除体内孕酮的干扰。其中与诱导剂米非司酮 称反式作用因子或序列特异性DNA结合蛋白