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荧光定量PCR服务介绍 北京艾比根生物技术有限公司 技术QQ 1492876083 手机 荧光定量PCR Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在 PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的 依据。 本公司的real-timePCR技术服务，根据实验目的，设计实验方案 （相对定量或绝对定量； SYBRGreenI或Taqman探针方法），用完全按照符合国际标准 （MIQE）的real-timeqPCR 试剂完成实验，提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。 服务要求 需提供新鲜或保存完好的细胞 （至少5×106）、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材 料；或纯化好的总RN （OD260/OD280在 1.9-2.1之间，完整性好）或总DN （OD260/OD280 在 1.7-1.9之间，完整性好）；或反转录好的cDN 不少于30μl （反转录的总RN 完整性 好，纯度在1.9-2.1之间）； 同时提供待测基因序列或登录号。 报告内容 总RNA(或DNA)浓度，电泳图片，扩增曲线，熔解曲线，Ct值以及数据统计分析 （可选）， 实验报告以及剩余引物和模板（可保存1个月） 特别说明 定量PCR价格里不包括样品制备费用，如需cDN ，DN 制备，费用另计。 一般情况下，3周左右可完成实验！若遇特殊原因，比如实验材料降解，需要重新提供样品 或者总RN 需要重新提取；基因表达量较低，需要构建标准品等情况，周期会有所延长。 检测方法 1. SYBR Green Ⅰ法： 在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后， 发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号 的增加与PCR产物的增加完全同步。 SYBR定量PCR扩增荧光曲线图 PCR产物熔解曲线图（单一峰图表明PCR扩增产物的单一性） 2. TaqMan探针法： 探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’ 外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接 收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR产物的形成完全同步。 服务流程 1. 客户认真写好订单，提供待检基因相关信息； 2. 签订技术服务合同，支付预付款（30-50%)； 3. 设计合成定量PCR 引物（或客户提供文献引物委托本公司合成）； 4. DNA/RNA 的抽提、定量、RNA反转录； 5. PCR预实验，主要检测引物的特异性和扩增效率； 6. 正式定量实验：对所有样品上机检测； 7. 实验结果和数据分析，形成报告。 收费标准 优惠包干价： 120元/样/基因 （SYBRgreenI法，相对定量） （含RNA提取，反转录，引物合成费用，上机测试费用 （3个重复）；一个内参免费 （内 参3个重复） 服务价格 周期（工作 项目流程 内容 价格 日） DNA样品 普通材料 （全血，细胞，组织，细菌） 3 20元/样 抽提RNA样品 普通材料（组织，细胞） 3 30元/样 DNA样品(粪便，土壤，病毒，口腔_ 3 询价 抽提特殊样品DNA或RNA 组织样品(全血，病毒，土壤，粪便，